[发明专利]一种硒化葫芦巴多糖的合成及其应用

摘要

本发明公开了一种合成硒化葫芦巴多糖的方法，包括葫芦巴多糖甲酰胺溶液的制备；离子液体的制备；离子液体对亚硒酸的活化；硒化葫芦巴多糖的合成。本发明采用离子液体活化亚硒酸，制备高活性硒化试剂，在温和条件下高效合成了具有生物活性的硒化葫芦巴多糖，硒含量达27554‑29773μg/g，所用试剂环保、制备简单，无需使用有毒的含硒中间体，无废液排放，有效缩短了反应所需时间，拓展了葫芦巴多糖作为天然活性物质的应用范围。活性试验表明，本发明合成的硒化葫芦巴多糖对HepG2肝癌细胞具有显著的体外抑制作用。

主权项

一种硒化葫芦巴多糖的合成方法，包括以下工艺步骤：（1）葫芦巴多糖甲酰胺溶液的制备：将葫芦巴多糖在60℃~80℃下，300~500 rpm搅拌2~5 h溶解于甲酰胺中，得葫芦巴多糖的甲酰胺溶液；（2）离子液体的制备：将浓硫酸在‑10℃~0℃下以50~80滴/min的速度滴加到N‑甲基吡咯烷酮中，300~800 rpm搅拌反应10~18 h，反应完毕后室温下用乙酸乙酯洗涤2~3遍，收集下层粘稠液体，在0.06~0.08 MPa、50~70℃下真空干燥6~12 h得离子液体；（3）离子液体对亚硒酸的活化：在60~80℃和N2保护的条件下，将亚硒酸加入到上述步骤（2）离子液体中反应1~3 h得活化后的亚硒酸；（4）硒化葫芦巴多糖的合成：将步骤（1）中得到的葫芦巴多糖的甲酰胺溶液用滴液漏斗以30~60滴/min的速度滴加到步骤（3）中离子液体活化好的亚硒酸中，在60~80℃和N2保护的条件下，300~800 rpm下反应2~4 h，待反应完毕后，在隔绝空气的条件下加入丙酮洗涤10~15次，将沉淀物装入截留分子量8000~14000 Da的透析袋中流水透析24~48 h，去离子水透析12~24 h，透析完毕后袋内物在真空度0.06~0.08 MPa下、55~65℃减压浓缩至原体积的1/20~1/30，在浓缩液中加入无水乙醇沉淀，4000~5000 rpm离心10~15 min收集下层沉淀物，在5~20 Pa、‑60~‑50℃下冷冻干燥24~48 h，得硒化葫芦巴多糖。