[发明专利]一种真核生物DNA的Hi‑C高通量测序建库方法有效
| 申请号： | 201610309577.X | 申请日： | 2016-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN105839196B | 公开（公告）日： | 2018-04-17 |
| 发明（设计）人： | 郑洪坤;刘慧;宋军;郭艳 | 申请（专利权）人： | 北京百迈客生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 101300 北京市顺*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种真核生物DNA的Hi‑C高通量测序建库方法，其中，DNA细胞核内环化步骤包括将末端修复后DNA与环化体系混合并在4‑6℃孵育2‑4h后在16‑22℃下孵育4‑6h获得内环化后物料；其中，所述环化体系的组成成分包括T4连接酶缓冲液、BSA、T4 DNA连接酶以及选自PEG 4000和PEG 6000中的至少一种的聚乙二醇。本发明所提供的方法能够有效的提高DNA的特性环化效率，获得明显高于传统方法的有效数据率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生物 dna hi 通量 测序建库 方法 | ||
【主权项】：
一种真核生物DNA的Hi‑C高通量测序建库方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：首先对样品进行甲醛交联获得交联后的物料，对所述交联后物料进行内切酶酶切获得酶切后物料，用生物素标记的碱基对所述酶切后物料进行末端修复，获得末端修复后DNA，对所述末端修复后DNA进行DNA细胞核内环化获得内环化后物料，再对所述内环化后物料进行解交联和纯化获得DNA测序文库；其中，DNA细胞核内环化步骤包括将末端修复后DNA与环化体系混合并在4‑6℃孵育2‑4h后在16‑22℃下孵育4‑6h获得内环化后物料；其中，所述环化体系的组成成分包括：T4连接酶缓冲液、BSA、T4DNA连接酶以及选自PEG 4000和PEG 6000中的至少一种的聚乙二醇。
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