[发明专利]一种用于内源性氨基酸检测的血浆样品前处理方法

摘要

一种用于内源性氨基酸检测的血浆样品前处理方法，其属于医学检测技术领域。其核心步骤是采用固体吸附剂特异性吸附血浆中的非极性生物基质，然后采用洗脱液对血浆中氨基酸类成分进行选择性洗脱进而获得内源性氨基酸组分。具体操作流程如下：血浆样品用一定比例的酸化水溶液稀释后，加样到特定的固体吸附剂中，通过优化洗脱溶剂的用量及配比等参数，实现了血浆中内源性氨基酸的选择性洗脱。所获内源性氨基酸组分浓缩后复溶，并在特定的色谱质谱条件下实现一次性多种内源性氨基酸的同步检测。该前处理方法具有操作简便可控、目标物回收率高、重现性好等特点，还避免了血浆中非极性物质对氨基酸定量检测的干扰，提高了检测灵敏度和准确度。

主权项

一种用于内源性氨基酸检测的血浆样品前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：1）血浆样品的预处理血浆样品经一次离心后取上层血浆，将血浆与体积分数为5%的酸按体积比1:1混合；经涡旋、超声、二次离心后，取上清液，作为上样溶液；一次离心的离心力介于3000‑5000g，二次离心的离心力介于13000‑18000g；2）固相吸附剂处理将固体吸附剂装填于固相小柱中，规格为100 mg的固体吸附剂装填1mL的小柱；所述固体吸附剂为硅胶键合的C1‑30的烷基颗粒，固体吸附剂的粒径为5~100 um，孔径为60~300 nm，比表面积为50~800 m²/g；使用前采用有机溶剂活化，再加入含有机溶剂和酸的水溶液进行平衡，所述含有机溶剂和酸的水溶液为含有体积比为5%的有机溶剂和体积比为0.1%的酸的水溶液；3）氨基酸组分的选择性洗脱上样后采用酸化的有机溶剂水溶液为洗脱剂，酸化的有机溶剂水溶液中体积比为有机溶剂∶水∶酸=10‑30∶89.9‑69.9∶0.1；加入洗脱剂后收集所有的洗脱液馏分；4）样品浓缩复溶检测收集到的洗脱液馏分浓缩至干后重溶于0.1moL/L的盐酸中，制成待测样品，适用于采用衍生化检测方法或非衍生化检测方法。