[发明专利]一种心肌功能检测用试剂盒及其制备方法有效
申请号: | 201610326801.6 | 申请日: | 2016-05-17 |
公开(公告)号: | CN105842463B | 公开(公告)日: | 2017-11-07 |
发明(设计)人: | 金鑫;曾滨;赵正道 | 申请(专利权)人: | 北京美康基因科学股份有限公司;南京美宁康诚生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京东方汇众知识产权代理事务所(普通合伙)11296 | 代理人: | 张淑贤 |
地址: | 100070 北京市丰台区南*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及免疫层析检测技术领域,具体公开了一种心肌功能检测用试剂盒及其制备方法。该试剂盒包括塑料板、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜,样本垫和吸水垫,所述玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的肌钙蛋白抗体、肌红蛋白抗体和肌酸激酶抗体的混合物;硝酸纤维素膜上设置有检测线1、检测线2、检测线3和控制线,检测线1上包被有肌钙蛋白二抗,检测线2上包被有肌红蛋白二抗,检测线3上包被有肌酸激酶二抗,控制线上包被有羊抗鼠lgG。该试剂盒,利用双抗体/抗原夹心原理结合量子点的荧光特性实现了采用荧光免疫层析的方法对肌钙蛋白、肌红蛋白和肌酸激酶进行快速、灵敏的联合检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 心肌 功能 检测 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种心肌功能检测用试剂盒的制备方法,其特征在于,所述试剂盒包括塑料板、设置在塑料板上的玻璃纤维素膜、设置在玻璃纤维素膜上的硝酸纤维素膜,所述硝酸纤维素膜上一端设有样本垫,对应的另一端设有吸水垫,其特征在于,所述玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体的混合物;所述硝酸纤维素膜上设置有检测线1、检测线2、检测线3和控制线,所述检测线1上包被有肌钙蛋白二抗,所述检测线2上包被有肌红蛋白二抗,所述检测线3上包被有肌酸激酶二抗,所述控制线上包被有羊抗鼠lgG;其制备方法包括以下操作步骤:1)原材料的制备:A:制备玻璃纤维素膜:将量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体、量子点标记的肌酸激酶抗体混合包被在玻璃纤维素膜上,干燥,备用;B:制备硝酸纤维素膜:取硝酸纤维素膜,间隔划分出检测线1、检测线2、检测线3和控制线,然后将肌钙蛋白二抗、肌红蛋白二抗、肌酸激酶二抗、羊抗鼠lgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2、检测线3和控制线上,之后将包被后的硝酸纤维素膜放入封闭液中封闭,干燥,备用;2)组装:在塑料板上放置步骤1)制备的玻璃纤维素膜,然后在步骤1)制备的玻璃纤维素膜上放置步骤1)制备的硝酸纤维素膜,然后在硝酸纤维素的一端放置样品垫,对应的另一端放置吸水垫,干燥,即完成;步骤A中还包括首先制备量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体的混合物,具体方法包括以下操作步骤:a:在胶乳颗粒悬浊液中加入改性环糊精,混匀24小时,纯化,得改性环糊精‑胶乳复合物悬浊液;b:在步骤a制备的改性环糊精‑胶乳复合物悬浊液中加入量子点,混匀24小时,纯化,得量子点‑改性环糊精‑胶乳复合物悬浊液;c:在步骤b制备的量子点‑改性环糊精‑胶乳复合物悬浊液中加入活化剂,活化15分钟,纯化,之后加入肌钙蛋白抗体,混匀2~4小时后,离心得沉淀物颗粒,将沉淀物颗粒用封闭液重悬,室温混匀1小时,之后再进行纯化,即得量子点标记的肌钙蛋白抗体;d:按照上述步骤a~c同样的方法制备量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体,然后将量子点标记的肌钙蛋白抗体、量子点标记的肌红蛋白抗体和量子点标记的肌酸激酶抗体混合,备用。
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