[发明专利]一种牙鲆微卫星标记Paraoliva-2的基因型检测引物和方法有效
申请号: | 201610332146.5 | 申请日: | 2016-05-19 |
公开(公告)号: | CN105755165B | 公开(公告)日: | 2019-10-15 |
发明(设计)人: | 刘云国;刘凌霄;李瑶瑶;刘传林 | 申请(专利权)人: | 烟台大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
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地址: | 264005 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种牙鲆微卫星标记Paraoliva‑2的基因型检测引物和方法。首先提取牙鲆肌肉中的基因组DNA并稀释备用;再利用牙鲆DNA序列中含有的微卫星核心序列,在其序列两端设计特异性引物;然后使用该引物对牙鲆不同地理群或牙鲆群内个体的基因组DNA进行PCR扩增,对PCR产物进行检测;利用产物出现的条带进行分析,确定每个个体的基因型,并获得牙鲆的遗传多态性图谱。本发明可快捷的获得牙鲆遗传标记Paraoliva‑2的遗传变异图谱,方法简便。 | ||
搜索关键词: | 一种 牙鲆微 卫星 标记 paraoliva 基因型 检测 引物 方法 | ||
【主权项】:
1.利用微卫星标记Paraoliva‑2对牙鲆基因型进行检测的方法,其特征在于,首先提取牙鲆肌肉中的基因组DNA并稀释备用;再利用牙鲆DNA序列中含有的微卫星核心序列,使用特异性引物对牙鲆不同个体的基因组DNA进行PCR扩增,对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,从而确定牙鲆不同个体在Paraoliva‑2核心序列区的基因型,其中所述的牙鲆微卫星标记Paraoliva‑2的特异性引物为:正链5’‑ CCACATGTATGTATTTGTCAGGGAG ‑3’,负链5’‑ GCCGAGCAGGAAGATGTCCCAGCT ‑3’,使用该引物时的退火温度为60℃;其中微卫星标记Paraoliva‑2的核心序列:cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca cacacacaca。
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