[发明专利]一种利用葡萄籽提取物制备低聚原花青素的方法

摘要

一种利用葡萄籽提取物制备低聚原花青素的方法，属于原花青素分离制备技术领域。本发明以葡萄籽提取物为原料，经溶解及过滤、真空浓缩、超滤、上柱及洗脱、纳滤以及冷冻干燥而制得低聚原花青素冻干粉和高聚原花青素冻干粉。该方法原料利用率高，分离精度高，分离效果好，产品纯度高，产品用途明确，实现原料的全部利用和溶剂的全部回收再利用，无“三废”排放，是典型的高科技绿色工艺。采用本方法制备出的产品可广泛用于医药及保健品等领域。

主权项

一种利用葡萄籽提取物制备低聚原花青素的方法，其特征在于具体的工艺步骤如下：(1)制备原花青素乙醇溶液称取一定量葡萄籽提取物，按照葡萄籽提取物质量/无水乙醇体积比为1∶50～100kg/L的比例，在搅拌下将其加入到无水乙醇中，处理10～30min后抽滤，分别收集滤渣和滤液，对收集的滤渣，主要含聚合度超过10的高聚体原花青素，用于制备饲料抗氧化剂；对收集的滤液，即为原花青素乙醇溶液，用于下一步制备初分离浓缩液；(2)制备初分离浓缩液第(1)步完成后，将第(1)步收集的原花青素乙醇溶液泵入真空浓缩器中，在温度为60～80℃、真空度为0.06～0.08MPa的条件下进行真空浓缩，直至浓缩液体积降低至原花青素乙醇溶液体积的1/10～1/20时止，分别收集真空浓缩液和真空浓缩冷凝液，对收集的真空浓缩冷凝液，用于再次溶解葡萄籽提取物；对于收集的真空浓缩液，按照该浓缩液体积/纯净水体积之比为1∶4～8L/L的比例加入纯净水，搅拌均匀后用截留分子量为1000～5000Da的超滤膜在表压为0.05～0.2MPa的条件下进行超滤，直至超滤截留液/超滤滤过液的体积比为1∶6～10L/L时止，分别收集超滤滤过液和超滤截留液，对收集的超滤截留液，即为初分离浓缩液，主要由低聚体原花青素组成，用于后续步骤制备低聚原花青素；对收集的超滤滤过液，主要含无机离子、单糖、寡糖和氨基酸，泵入生化处理池进行生化处理，达标后排放；(3)装配MCI GEL树脂层析分离系统将市售MCI GEL树脂CHP20P或CHP 2MG Y先用体积分数为5～10％的乙醇溶液分散，再用恒流泵泵入中压层析柱中，其中MCI GEL树脂CHP20P或CHP 2MG Y质量与体积分数为5～10％的乙醇溶液体积之比为1∶5～10kg/L，然后将中压层析柱分别与恒流泵和在线紫外检测器连接，就装配出CHP20P或CHP 2MG Y树脂层析分离系统；(4)制备低聚原花青素浓缩液第(3)步完成后，将第(2)步收集的初分离浓缩液泵入MCI GEL树脂CHP20P或CHP 2MG Y层析分离系统，泵入的初分离浓缩液体积与MCI GEL树脂CHP20P或CHP 2MG Y质量之比为1∶10～20L/kg，泵完初分离浓缩液后，再泵入体积分数为5～10％的乙醇溶液进行洗脱，泵入量为树脂柱体积的6～8倍，泵入流速为树脂柱体积(BV)的3～6倍/小时，分段收集洗脱液，将第1～2BV、第4.1～5BV和第7.1～8BV的洗脱液合并，第1～2BV、4.1～5BV和第7.1～8BV的洗脱液均为体积分数为5～10％的乙醇溶液，用于下批次洗脱；第2.1～4BV的洗脱液含高聚原花青素，用于制备高聚原花青素冻干粉；第5.1～7BV的洗脱液含低聚原花青素，用于制备低聚原花青素冻干粉，洗脱完原花青素的MCI GEL树脂CHP20P或CHP 2MG Y，可用于下批次分离低聚原花青素和高聚原花青素；(5)制备低聚原花青素冻干粉第(4)步完成后，将第(4)步收集的第5.1～7BV的洗脱液泵入截留分子量为200～600Da的纳滤膜，在表压为0.2～0.5MPa的条件下进行纳滤，直至纳滤截留液/纳滤滤过液的体积比为1∶6～10L/L时止，分别收集纳滤截留液和纳滤滤过液，对收集的纳滤滤过液，与第(4)步分段收集的第1～2BV、4.1～5BV和第7.1～8BV的洗脱液合并，用于洗脱下批次原花青素；对收集的纳滤截留液，泵入超低温真空浓缩器中，在温度为20～40℃、真空度为0.0086～0.0098MPa的条件下进行真空浓缩，直至无乙醇浓缩出时为止，分别收集真空浓缩液和真空浓缩冷凝液，对收集的真空浓缩液，在真空度为30～50Pa、温度为‑50～‑40℃的条件下冷冻干燥24～30小时，就制备出低聚原花青素冻干粉；对收集的真空浓缩冷凝液，用于制备无水乙醇；(6)制备高聚原花青素冻干粉第(4)步完成后，将第(4)步收集的第2.1～4BV的洗脱液泵入截留分子量为5000～10000Da的超滤膜，在表压为0.05～0.2MPa的条件下进行超滤，直至超滤截留液/超滤滤过液的体积比为1∶6～10L/L时止，分别收集超滤滤过液和超滤截留液，对收集的超滤滤过液，与第(4)步分段收集的第1～2BV、4.1～5BV和第7.1～8BV的洗脱液合并，用于洗脱下批次原花青素；对收集的超滤截留液，泵入超低温真空浓缩器中，在温度为20～40℃、真空度为0.0086～0.0098MPa的条件下进行真空浓缩，直至无乙醇浓缩出时为止，分别收集真空浓缩液和真空浓缩冷凝液，对收集的真空浓缩液，在真空度为30～50Pa、温度为‑50～‑40℃的条件下冷冻干燥24～30小时，就制备出高聚原花青素冻干粉；对收集的真空浓缩冷凝液，用于制备无水乙醇。