[发明专利]一种评价皮肤刺激性的方法、装置及其应用

摘要

外用药物制剂和化妆品均需进行皮肤刺激性检查，传统方法采用活体动物涂抹受试产品后的皮肤反应来判断皮肤刺激性的程度，存在成本较高、试验周期长、个体差异大、动物伦理学问题等不足之处。鉴于此，本发明提供一种评价皮肤刺激性的装置在脂质体中包封指示剂制备脂质体人工皮肤膜并结合到膜嵌套装置中。使用时，脂质体人工皮肤膜表面涂抹受试品后，由接受室的接受液中指示剂颜色判断皮肤刺激性强弱。此方法成本低、效率高、可控性和重现性高，且实验证实其测试结果与动物试验结果基本一致，从而能够替代动物实验，节约经济和时间成本，为外用药物制剂和化妆品的安全性评价提供有力的技术保障。

主权项

一种评价皮肤刺激性的装置，其特征在于：包含膜嵌套装置和脂质体人工皮肤膜；其中膜嵌套装置由嵌套板、膜嵌套两部分组成，膜嵌套位于嵌套板的孔中，脂质体人工皮肤膜结合在膜嵌套上；脂质体人工皮肤膜按如下步骤制备：（1）含有指示剂的脂质体的制备：将磷脂材料溶解于有机溶剂中，指示剂溶解在50~120份含有5~15 %乙醇的磷酸盐缓冲液中，选择薄膜法、注入法或逆相蒸发法制备脂质体，得到的脂质体混悬液采用高压均质或者超声技术减小粒径，分别制得粒径为150~400nm的含指示剂小粒径脂质体和粒径为400~800nm的含指示剂大粒径脂质体；其中所述磷脂材料包含重量比为1~8 : 1的卵磷脂，胆固醇；指示剂选自罗丹明B、钙黄绿素、羧基荧光素、依文思蓝或异硫氰酸荧光素；（2）微孔滤膜与膜嵌套底部的密封：将孔径为0.45 μm的微孔滤膜和膜嵌套底部150 ℃加热，使微孔滤膜与嵌套底部形成完全密封的小室；（3）脂质体与微孔滤膜的结合：将步骤（1）制备所得的1~10份粒径为150~400nm的含指示剂小粒径脂质体和1份粒径为400~800nm的含指示剂大粒径脂质体分别通过离心分层铺于微孔滤膜膜上；（4）冻融循环；将步骤（3）中结合脂质体后的微孔滤膜置于‑70~‑120 ℃冷冻0.5~1 h，取出后50~75 ℃加热0.5~1 h，如此循环冻融2~3次，即得脂质体人工皮肤膜。