[发明专利]一种苜蓿多糖的提取和纯化方法

摘要

本发明公开了一种提取和纯化苜蓿多糖的方法。该方法包括1)将苜蓿粉末用水浸提两次，合并两次所得的滤液，浓缩后醇析，收集析出物后离心或过筛，收集沉淀，再加水溶解所述沉淀，得到粗苜蓿多糖溶液；2)将步骤1)所得粗苜蓿多糖溶液依次进行透析和脱蛋白处理，将脱蛋白所得体系沉淀后离心或过筛，收集上清液，醇析后，收集沉淀，干燥，得到所述苜蓿多糖。本发明对苜蓿多糖传统的水煮醇提方法加以改进，增加透析过程，并通过α‑萘酚实验，斐林实验，茚三酮实验，三氯化铁实验和蒽酮‑硫酸比色法对样品进行定性和定量检测，结果发现改进方法得到的苜蓿多糖纯度高达89.87％。

主权项

一种提取和纯化苜蓿多糖的方法，包括如下步骤：1)将苜蓿碎段用水浸提两次，合并两次所得的滤液，浓缩后醇析，收集析出物后离心或过筛，收集沉淀，再加水溶解所述沉淀，得到粗苜蓿多糖溶液；2)将步骤1)所得粗苜蓿多糖溶液依次进行透析和脱蛋白处理，将脱蛋白所得体系沉淀后离心或过筛，收集上清液，醇析后，收集沉淀，干燥，得到所述苜蓿多糖；所述步骤2)透析步骤中，透析液为去离子水；所述透析包括如下步骤：将透析袋一端用透析夹夹住，加入70％透析袋体积的所述步骤1)所得粗苜蓿多糖溶液，然后用夹子夹住另一端，用去离子水透析，在第3h、第9h和第18h更换去离子水透析，第30h时收集透析袋中溶液；透析的温度为4℃；透析袋的截留分子量为8000‑14000D；所述脱蛋白步骤中，脱蛋白剂为质量百分浓度为≥95％的三氯甲烷的水溶液；所述脱蛋白的时间为上清液由深褐色变为浅黄色或大量出现土黄色絮状沉淀；所述沉淀步骤中，温度为5‑10℃；时间为12h。