[发明专利]一种从刺糖多孢菌发酵液中提取多杀菌素的方法

摘要

本发明涉及一种从刺糖多孢菌发酵液中提取多杀菌素的方法，包括发酵液预处理、过活性炭柱去除大量色素和胶粘性杂质、多杀菌素萃取、反萃取、精滤、析晶、分离及干燥等步骤。与现有技术相比，本发明预处理采用复合酶来处理刺糖多孢菌的菌丝体，使产生于菌丝体内的多杀菌素释放至发酵液中；同时应用活性炭柱来去除发酵液中含有的大量色素和胶质等杂质，大大有利于多杀菌素产品纯度的提高。本发明具有操作简单、周期短、过程安全、成本低、收率和纯度高等优点。

主权项

一种从刺糖多孢菌发酵液中提取多杀菌素的方法，其特征在于，该方法采用以下步骤：(1)发酵液预处理：按刺糖多孢菌发酵液体积0.05～0.15w/v％的量加入复合酶，搅拌后加入草酸调整pH值为4.0～5.0，使发酵液中形成大量的絮状悬浮物，过滤后收集滤清液；(2)过活性炭柱去除大量色素和胶粘性杂质：将步骤(1)中的滤清液上活性炭柱，收集过柱液，得到富集多杀菌素的水相；(3)多杀菌素萃取：使用乙酸乙酯作为萃取剂，加入量为水相体积的1/4～1/2，萃取富集多杀菌素水相中的多杀菌素，得到负载有机相；(4)反萃取：以酒石酸溶液为反萃取剂，加入量为负载有机相体积的0.5～1.5倍进行反萃取，收集反萃取相；(5)精滤：利用精细过滤器对反萃取相进行精滤，得到高纯精滤液；(6)析晶：用NaOH溶液调节高纯精滤液的pH值至9～11.5，使多杀菌素以晶体形式析出，得到结晶液；(7)分离：使用离心机对结晶液进行离心分离，控制离心机的转速为1000～1400rpm，得到多杀菌素湿晶；(8)干燥：对得到的多杀菌素湿晶进行真空干燥，即得到多杀菌素。