[发明专利]一种测定血液中抗体氨基酸序列的方法在审

专利信息
申请号: 201610450920.2 申请日: 2016-06-21
公开(公告)号: CN107525934A 公开(公告)日: 2017-12-29
发明(设计)人: 张效龙;金茜 申请(专利权)人: 张效龙;金茜
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N27/62
代理公司: 北京宣言律师事务所11509 代理人: 赵建刚
地址: 100040 北京市石景山区*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 一种测定血液中抗体氨基酸序列的方法,其目的是通过生物化学方法直接测定人或动物血液中抗体的氨基酸序列。本方法包括的步骤为A、将与特定抗原结合的特异性抗体从血液或血液制品中分离;B、将分离的特异性抗体采用蛋白酶酶切产生抗体片段;C、将得到的抗体片段采用SDS‑PAGE电泳与离子交换色谱、正向色谱、反向色谱、二维电泳或等电聚焦电泳分离,得到不超过五个不同氨基酸序列抗体片段的组分;D、将分离的抗体片段组分切割成5到60个氨基酸的肽段;E、测定所得到肽段的氨基酸序列;和F、将测定的肽段氨基酸序列通过重叠部分拼接成抗体序列。
搜索关键词: 一种 测定 血液 抗体 氨基酸 序列 方法
【主权项】:
一种测定血液中抗体氨基酸序列的方法,其包括的步骤为:A、将与特定抗原结合的特异性抗体从血液或血液制品中分离;B、将步骤A中分离的特异性抗体采用蛋白酶酶切产生抗体片段,所述抗体片段包括F(ab’)2、Fab或Fc;C、将步骤B中得到的抗体片段采用一维聚丙烯酰胺电泳与离子交换色谱、正向色谱、反向色谱、二维聚丙烯酰胺电泳或等电聚焦电泳分离,得到不超过五个不同氨基酸序列抗体片段的组分;D、将步骤C中分离的每个抗体片段组分进一步切割成5‑60个氨基酸的肽段,所述切割方法为采用蛋白酶切割法或化学反应切割法,其中所述蛋白酶切割法采用至少三种蛋白酶;E、测定步骤D中所得到肽段的氨基酸序列;F、将步骤E中测定的肽段氨基酸序列通过重叠部分拼接成抗体序列。
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