[发明专利]采用分子印迹固相萃取法分离纯化发酵液中吡咯喹啉醌的方法

摘要

本发明公开了一种采用分子印迹固相萃取法分离纯化发酵液中吡咯喹啉醌的方法，该方法主要利用吡咯喹啉醌分子印迹聚合物从富含吡咯喹啉醌发酵液中分离纯化得到吡咯喹啉醌。本发明以二氧化硅为基材，吡咯喹啉醌为模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，采用热聚合技术制备得到吡咯喹啉醌分子印迹聚合物。吸附性能实验表明，本发明制备的吡咯喹啉醌分子印迹聚合物具有较好的特异、选择吸附目标物吡咯喹啉醌的性能，最大吸附容量可达10mg/mg(分子印迹聚合物)。以该聚合物为固相萃取填料对目标产物吡咯喹啉醌进行固相萃取，实现了从发酵液中高效分离纯化吡咯喹啉醌的目的。

主权项

采用分子印迹固相萃取法分离纯化发酵液中吡咯喹啉醌的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）制备：利用吡咯喹啉醌生产菌制备含有吡咯喹啉醌的发酵液；（2）萃取分离：采用分子印迹固相萃取法对含有吡咯喹啉醌的发酵液进行萃取，将含有吡咯喹啉醌的发酵液上样于装填有分子印迹聚合物的分子印迹萃取柱内，然后依次用乙醇和乙醇‑有机酸混合液洗脱，收集乙醇‑有机酸混合洗脱液，减压浓缩，得到吡咯喹啉醌粗品；（3）纯化：将吡咯喹啉醌粗品用超纯水溶解，调节pH至3‑4，加入乙醇，搅拌后静置，得到吡咯喹啉醌；所述的分子印迹聚合物是以二氧化硅为基材，吡咯喹啉醌为模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，采用热聚合技术制备而成。