[发明专利]一种两阶段pH控制缩短乳酸菌高盐发酵周期的方法

摘要

本发明公开了一种基于两阶段pH控制策略缩短乳酸菌高盐发酵周期的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明以嗜盐四联球菌（Tetragenococcus halophilus）CGMCC no.3792为发酵菌株，所用发酵培养基为（w/v）：葡萄糖0.5%，大豆蛋白胨6.4%，胰蛋白胨8%，七水硫酸镁0.025%，抗坏血酸0.05%，氯化钠12%，用蒸馏水配制，pH为6.5，121℃灭菌20 min；在发酵第一阶段（0~60小时）将pH控制在6.5，在发酵第二阶段（60小时后）将pH控制在6.0。以本发明提供的操作方法简便可靠，有效地缩短了12小时的发酵时间，并且生物量提高了17.3%，为乳酸菌在实际的发酵生产应用中提供一种有效的方法。

主权项

1.一种两阶段pH控制策略缩短乳酸菌高盐发酵周期的方法，包含以下步骤：(1)种子培养；取‑80℃保藏的乳酸菌甘油管储存液，以体积比为5％的接种量接种于种子培养基中，30℃静置培养24小时；(2)二级种子扩大培养；取上述活化种子液，以体积比为5％的接种量接种于扩大培养基中，30℃静置培养24小时；(3)5L发酵罐培养；取上述二级种子，以体积比为5％的接种量接种于5L发酵罐中30℃培养，发酵罐装液量为4L，搅拌转速为150r/min；所述两阶段pH控制策略为：在5L发酵罐中，在发酵0～60小时的第一阶段将pH控制为6.5，在发酵60小时后的第二阶段将pH控制为6.0；所述乳酸菌为嗜盐四联球菌，其保藏编号为CGMCC no.3792；所述种子培养基按质量体积比计为：葡萄糖0.5％，大豆蛋白胨2％，七水硫酸镁0.025％，抗坏血酸0.05％，氯化钠0％，pH为6.5；所述二级种子扩大培养基按质量体积比计为：葡萄糖0.5％，胰蛋白胨0.5％，大豆蛋白胨0.5％，牛肉膏0.5％，酵母膏0.25％，七水硫酸镁0.025％，抗坏血酸0.05％，β‑甘油磷酸钠1.9％，氯化钠6％，pH为6.5；所述发酵培养基按质量体积比计为：葡萄糖0.5％，大豆蛋白胨6.4％，胰蛋白胨8％，七水硫酸镁0.025％，抗坏血酸0.05％，氯化钠12％，pH为6.5。