[发明专利]一种鸭儿芹的组织培养方法

摘要

本发明提供一种鸭儿芹的组织培养方法。现有技术中的鸭儿芹的组织培养，存在侧芽诱导率低、愈伤组织不能继续分化产生不定芽的问题，无法进行鸭儿芹的大量繁殖。一种鸭儿芹的组织培养方法，包括以下步骤(1)外植体消毒处理；(2)愈伤组织诱导；(3)分化培养；(4)生根培养；(5)炼苗和移栽。本发明的方法用于鸭儿芹组织培养，克服其种子休眠期长、发芽率低等缺点，具有繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，移栽成活率高的优点。可达到规模化生产的要求，而且能有效保持母本的优良遗传性状，保证了种苗的品质和质量。

主权项

一种鸭儿芹的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1) 外植体消毒处理：选取生长良好的鸭儿芹一年生嫩茎，依次用洗衣粉浸泡10min，自来水冲洗3h，用75%乙醇灭菌20~40s，无菌水冲洗3~5次，再用质量浓度为1.5~3.5%的NaClO灭菌5~10min，无菌水冲洗3~5次后，用灭菌滤纸吸干表面水分，最后将消毒处理后的鸭儿芹置于无菌干净的培养皿中备用；(2) 愈伤组织诱导：将步骤(1)中消毒好的鸭儿芹嫩茎切成约1cm的小段，竖直插入诱导培养基中，进行暗培养30天，温度23~25℃；(3)分化培养：将步骤(2)中产生的愈伤组织接入分化培养基中培养6周，温度23~25℃，光照12h/d，光照度为2000~2400lx；(4) 生根培养：将步骤(3)中产生的丛生芽切成单株，接入生根培养基中培养，温度23~25℃，光照12h/d，光照度为2000~2400lx，2周后，基部长出根系，长度达到2~5cm；(5) 炼苗和移栽：将步骤(4)中高度大于4cm，叶片在4~6片，根系长度2~5cm的鸭儿芹组培苗进行炼苗，先将培养瓶的瓶盖打开，室温下炼苗3d后，取出试管苗，洗净根部的培养基，移栽到准备好的基质上，保持温度不低于10℃，不高于30℃，湿度85%~95%，适当遮阴，常规管理，所述步骤(4)中的生根培养基为1/2MS培养基，所述培养基内加入0.5~1.5mg/L吲哚丁酸、30g/L蔗糖和7g/L琼脂粉，调节pH为5.8，所述步骤(2)中的诱导培养基为MS培养基，所述培养基内加入0.5~1.0mg/L 的2，4‑二氯苯氧乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂粉，调节pH为5.8，所述步骤(3)中的分化培养基为MS培养基，所述培养基内加入1.5~2.0mg/L 的6‑苄基腺嘌呤、0.1~0.2mg/L的萘乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂粉，调节pH为5.8。