[发明专利]特异捕获并重复复制低频率DNA碱基变异的方法及应用有效
申请号: | 201610662853.0 | 申请日: | 2016-08-12 |
公开(公告)号: | CN106282161B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 徐凯;罗德伦;唐放 | 申请(专利权)人: | 成都诺恩基因科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6886;C40B50/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610041 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种特异捕获并重复复制低频率DNA碱基变异的方法,属于分子诊断领域其步骤包括:(1)对DNA进行热变性,然后用具有热力学动态结构的引物混合物对目标DNA进行杂交,然后重复复制;(2)利用与测定目标3´端匹配的寡聚核苷酸对重复复制的次生DNA片段进行特异性延伸、加尾,并在其3´端引入一段共同序列;(3)构建测序文库;(4)生成多个测序读值;(5)鉴定测序读值与参考序列之间的序列差异;(6)判定是否为序列变体;本发明可对于低频率DNA碱基变异的检测灵敏度可以达到0.01%,对在正常序列背景中可能含有少量变异序列的样品中的低频率核酸变异的鉴定和阐明,以及对在测序错误背景下的低频变异的鉴定有极大的帮助。 | ||
搜索关键词: | 特异 捕获 重复 复制 频率 dna 碱基 变异 方法 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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