[发明专利]一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用有效
申请号: | 201610689925.0 | 申请日: | 2016-08-19 |
公开(公告)号: | CN106635865B | 公开(公告)日: | 2019-08-13 |
发明(设计)人: | 郝华芳;陈胜利;储岳峰;赵萍;刘永生 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/35 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 张秋云 |
地址: | 730000 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基,每1000ml培养基中包括有以下组分:PPLO肉汤10.5 g、脑心浸出液8.0 g、氯化钠4.0 g、硫酸镁0.05 g、氯化钾0.2 g、氯化钙0.09 g、磷酸氢二钠0.024 g、磷酸二氢钾0.03 g、葡萄糖5.0 g、水解乳蛋白5.0 g、25%新鲜酵母浸出液60 ml、无菌猪血清100 ml、无菌马血清100 ml、氨苄青霉素100 mg、10%醋酸铊1 ml;并提供了其制备方法及应用。本发明的有益效果为:本发明提供的一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用,与现有技术相比,具有生长迅速和滴度高的特点,分离出牛鼻支原体的成功率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 支原体 分离 纯化 培养基 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种用于牛鼻支原体分离纯化的液体培养基,其特征在于,每1000ml液体培养基是由以下组分制备得到的:PPLO肉汤10.5 g、脑心浸出液8.0 g、氯化钠4.0 g、硫酸镁0.05 g、氯化钾0.2 g、氯化钙0.09 g、磷酸氢二钠0.024 g、磷酸二氢钾0.03 g、葡萄糖5.0 g、水解乳蛋白5.0 g、25%新鲜酵母浸出液60 ml、1%酚红2.5 ml、无菌猪血清100 ml、无菌马血清100 ml、氨苄青霉素100 mg、10%醋酸铊1 ml、余量为去离子水;所述25%新鲜酵母浸出液的制备方法为:取鲜酵母500g,加入去离子水2000 ml中,搅拌溶解,用盐酸溶液调pH值至4.5‑5.0,80℃水浴30分钟,3000 转/分离心20分钟,取上清液,将上清液用1 M NaOH调pH值至7.8,煮沸,置室温放凉后用双层滤纸过滤,再补水至2000 ml,即得到25%新鲜酵母浸出液,‑20℃保存备用;所述盐酸溶液中,按照体积比浓盐酸:水为1:1。
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