[发明专利]超灵敏检测癌细胞的电致化学发光细胞传感器的制备方法

摘要

本发明公开了一种超灵敏检测癌细胞的电致化学发光细胞传感器的制备方法。通过原位生长法制备具有大的比表面积、良好的生物相容性和导电性的三维花状的纸金电极，利用其捕获目标癌细胞，通过癌细胞与特定适配体的特异性结合作用，将修饰有银纳米粒子的多枝杂交链负载在电极表面，然后在多枝杂交链上修饰和沉积大量的石墨烯量子点和银纳米粒子，完成电致化学发光细胞传感器的制备，利用多枝杂交链信号放大技术和银纳米粒子可以增强石墨烯量子点电致化学发光的性能实现信号放大，进而实现对癌细胞的超灵敏、准确检测。

主权项

1.一种超灵敏检测癌细胞的电致化学发光细胞传感器的制备方法，其特征是包括以下步骤：（1）在计算机上利用Adobe illustrator CS4软件设计微流控纸芯片的疏水蜡打印图案，将设计好的打印图案通过蜡打印机打印在色谱纸上，然后将打印过的色谱纸放在烘箱中，在130 ℃加热50秒使蜡融化并渗透整个色谱纸的厚度，形成疏水墙；（2）在计算机上设计与步骤（1）中获得的蜡打印图案相匹配的工作电极、对电极和参比电极的印刷图案，并利用丝网印刷技术在步骤（1）中获得的蜡打印色谱纸上印刷碳工作电极、碳对电极和Ag/AgCl参比电极；（3）利用原位生长法在步骤（2）中获得的碳工作电极的工作区域生长三维花状的金；（4）将伴刀豆球蛋白A修饰在步骤（3）中获得的纸芯片的工作区域，采用牛血清白蛋白封闭非特异性结合位点，然后利用伴刀豆球蛋白A捕获癌细胞；（5）将AgNPs修饰的多枝杂交链固定在步骤（4）中获得的纸芯片的工作区域；（6）将GQDs修饰在步骤（5）中获得的多枝杂交链上；（7）在步骤（6）中获得的多枝杂交链上沉积AgNPs；（8）在步骤（7）中获得的纸芯片的工作区域，滴加10 μL包含0.1 M K2S2O8的pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液（PBS），在电压范围为0 ~ ‑1.6V进行ECL信号检测，光电倍增管电压为800 V，绘制ECL强度与癌细胞浓度的标准曲线，实现对癌细胞的检测。