[发明专利]一种寡聚核苷酸的纯化方法及应用

摘要

本发明提供了一种对经DNA合成仪合成的寡聚核苷酸进行纯化的方法，包括以下步骤：采用C18反相柱或固相萃取纯化柱对粗DNA进行纯化，其中以非极性键合硅胶或弱极性键合硅胶为固定相或使用寡聚核苷酸固相萃取纯化柱填料为载体，以乙腈/水，和/或浓氨水，和/或去离子水，和/或三氟乙酸，为流动相进行洗脱纯化，收集目的寡聚核苷酸溶液，将所收集的DNA溶液进行浓缩。通过本方法纯化得到的寡聚核苷酸纯度高，收率高，并且本方法操作简单，成本低。

主权项

1.一种带有5′‑二甲氧基三苯甲基保护基DMT的寡聚核苷酸的纯化方法，包括以下步骤：a、使用Cartridge柱OPC为载体，以体积比为100‑80∶0‑20的乙腈和水为流动相，在不使用真空泵的条件下冲洗柱子，冲洗后将柱子完全抽干以除去柱子中的残留杂质；b、用三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液Tris‑HCl活化柱子，所述Tris‑HCl的浓度为0.5M，pH为7.5；c、上样；d、以浓氨水溶液为A相、去离子水为B相、三氟乙酸TFA水溶液为C相，按照A相‑B相‑C相‑B相的先后顺序进行洗脱纯化，其中，C％为4％，A相的pH为9.5；e、用水和乙腈为洗脱液对固相进行梯度洗脱；所述梯度洗脱，是用水和乙腈梯度洗脱的比例依次为：3:1→2:1→1:1，每种比例的水和乙腈1ml，循环进行洗脱；f、收集目标寡聚核苷酸溶液。