[发明专利]检测肿瘤相关的50个热点突变基因的捕获文库和试剂盒

摘要

本发明公开一种检测肿瘤相关的50个热点突变基因的试剂盒及方法，其针对肿瘤学研究相关的50个基因(包括致癌基因和抑癌基因)的207个热点突变区域的捕获方法，以及捕获使用的液相杂交文库的制备方法。具体为选取207个热点突变区域的序列信息，设计PCR引物，利用PCR方法制备生物素标记的液相杂交捕获文库，利用其与构建好的靶标基因组DNA文库杂交，对捕获到的片段进行高通量测序和生物信息学分析，从而获得样本的核酸序列位点变异情况。本发明提供的方法，可获得高质量的测序数据，具有更高捕获效率和更好的靶标位点的均一性捕获，解决了固相杂交的效率低、均一性差等缺点，大大的降低了测序成本。 1

主权项

1.一种肿瘤相关突变基因的捕获文库的构建方法，其特征在于：包括筛选出的207个突变基因，其基因名称和染色体坐标信息为：还包括扩增上述207个突变基因的引物对，其碱基序列如SEQ ID NO.1～414所示；利用上述的引物，用标化的人基因组DNA作为模板进行PCR扩增、纯化、分别定量后，均一等量混合207个PCR产物，将混合的PCR产物通过进行片段 化处理，获得大小为70‑130bp的DNA片段 ，通过表面带有链霉亲和素标记的磁珠来分离纯化带有生物素标记的含有目标基因DNA片段 ，从而获得带有生物素标记的捕获文库。