[发明专利]果蝇S2细胞瞬时转染的方法有效
申请号: | 201610753727.6 | 申请日: | 2016-08-29 |
公开(公告)号: | CN107779472B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 沈潇;林兴华;林泽斌 | 申请(专利权)人: | 佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 林青中 |
地址: | 528000 广东省佛山市顺德区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种果蝇S2细胞瞬时转染的方法,其包括如下配置转染试剂溶液、配置转染复合物及瞬时转染等步骤。该果蝇S2细胞瞬时转染的方法使用几丁聚糖作为转染试剂,转染效率较之多聚赖氨酸、脂质体或磷酸钙等转染试剂有明显提高,蛋白产品也显著提高。在分析含目的DNA的质粒与转染试剂形成的转染复合物的大小后发现,几丁聚糖与含目的DNA的质粒形成的转染复合物最小。几丁聚糖作为转染试剂具有价格低廉、操作简单且转染后蛋白产量较高的优点,可适用于果蝇S2细胞的大规模瞬时转染,可在较低成本短时间内获得大量重组蛋白。 | ||
搜索关键词: | 果蝇 s2 细胞 瞬时 转染 方法 | ||
【主权项】:
一种果蝇S2细胞瞬时转染的方法,其特征在于,包括如下步骤:配置转染试剂溶液:将几丁聚糖溶于pH 3‑10无菌水中,配置成浓度为0.1‑10g/ml的转染试剂溶液;配置转染复合物:按照几丁聚糖与待转染的含目的DNA的质粒的质量比为1‑20:1的比例将所述转染试剂溶液与待转染的含目的DNA的质粒溶液加入无菌水中,震荡混匀,形成转染复合物;瞬时转染:将所述转染复合物加入已传代培养的果蝇S2细胞悬液中,摇晃培养,得到已转染含目的DNA的质粒的果蝇S2细胞。
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