[发明专利]一种利用复合材料二次固定化汉逊德巴利酵母的方法有效
申请号: | 201610767902.7 | 申请日: | 2016-08-23 |
公开(公告)号: | CN106967708B | 公开(公告)日: | 2020-08-18 |
发明(设计)人: | 董玉玮;高明侠;王陶;张传丽 | 申请(专利权)人: | 徐州工程学院 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/10;C12N11/084;C12N11/04;C12R1/645 |
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地址: | 221111 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用复合材料二次固定化汉逊德巴利酵母的方法,包括以下步骤:采用海藻酸钠与活性炭固定化汉逊德巴利酵母;采用聚乙烯醇与海藻酸钠二次固定化汉逊德巴利酵母;将二次固定化后汉逊德巴利酵母置于发酵培养基中培养。本发明制备方法新颖、简便,操作程序易于控制,产量高,客服了传统菌种产3‑羟基丙酸产量低的缺点。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 复合材料 二次 固定 化汉逊德巴利 酵母 方法 | ||
【主权项】:
一种利用复合材料二次固定化汉逊德巴利酵母的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将汉逊德巴利酵母依次经种子斜面培养基活化、发酵培养基培养后,通过无菌纱布过滤分离汉逊德巴利酵母液体发酵菌种和发酵培养基,得汉逊德巴利酵母液体发酵菌种液;S2、将海藻酸钠、活性炭的混合物与所得的汉逊德巴利酵母液体发酵菌种与按照0.5∶1‑1∶1(w/v)比例混合,得混合液;其中,海藻酸钠终浓度为25‑35g/L,活性炭终浓度为8‑10g/L;S3、用注射器吸取混合液滴入浓度为19‑21g/L的CaCl2溶液内,室温固定1‑3h,得直径0.3‑0.5cm的固定化汉逊德巴利酵母小球,无菌纱布过滤分离小球后无菌水清洗2次;S4、按照2‑3个小球/mg过滤后的菌种的标准,将步骤S3所得的汉逊德巴利酵母小球与过滤分离后的上述S1步骤的液体发酵菌种混合,再加入聚乙烯醇和海藻酸钠并混匀,聚乙烯醇终浓度为80‑100g/L,海藻酸钠终浓度在9‑11g/L;用直径0.8cm吸管吸取混合液滴入浓度为9‑11g/L的CaCl2溶液内,室温固定1‑3h,4℃冰箱固定1‑3h,得直径0.8‑1.2cm的固定化汉逊德巴利酵母小球,无菌纱布过滤分离小球后无菌水清洗2次;S5、将步骤S4所得的汉逊德巴利酵母小球加入到80‑120ml液体发酵培养基/250ml锥形瓶培养,28‑32℃,在转速为220‑280r/min的恒温振荡箱中培养48‑72h。
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