[发明专利]在果蝇细胞中高表达人GAD65蛋白的基因序列和蛋白制备方法有效
| 申请号： | 201610771314.0 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN106399336B | 公开（公告）日： | 2017-12-05 |
| 发明（设计）人： | 周智广;郑沛林;黄干;谢志国;易波 | 申请（专利权）人： | 中南大学湘雅二医院 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/85 |
| 代理公司： | 长沙市融智专利事务所43114 | 代理人： | 袁靖 |
| 地址： | 410011 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供一种高表达人GAD65蛋白的基因序列和蛋白制备方法,真核宿主为果蝇S2细胞。通过探讨密码子使用种属偏好性，对人GAD65的原始基因序列进行密码子优化，得到一个可提高重组蛋白表达效率的全新GAD65基因序列，如SEQ NO.1所示。本发明提供了承载人全新GAD65序列的果蝇细胞高表达载体，包含如SEQ NO.1所示的GAD65基因序列。GAD65含有StrepII标签，通过一步亲和层析纯化即可获得高纯度、高免疫原性的GAD65蛋白，大大提高了重组蛋白的得率并降低了成本。本发明改变了传统的用酵母或昆虫杆状病毒表达系统获得人GAD65的方法，首次利用果蝇S2细胞这一高密度连续培养体系大量表达GAD65，通过StrepII标签快速制备高纯度、低成本并具有良好免疫原性的人GAD65蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 果蝇 细胞 中高 表达 gad65 蛋白 基因 序列 制备 方法 | ||
【主权项】：
编码在果蝇细胞中高表达的人GAD65蛋白的基因，其特征在于，所述的基因序列如SEQ ID NO.1所示。
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