[发明专利]用于高等真菌基因中断的方法有效
| 申请号： | 201610794735.5 | 申请日： | 2016-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN107779466B | 公开（公告）日： | 2021-01-08 |
| 发明（设计）人： | 肖晗;秦浩;钟建江 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N15/113;C12N15/55;C12N1/15 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王毓理;王锡麟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种用于高等真菌基因中断的方法，通过将含有密码子优化的Cas9基因的表达载体转入单倍体灵芝(Ganoderma lucidum，CGMCC NO.5.26)中，获得了可稳定表达Cas9蛋白的灵芝菌株；然后将经体外转录的gRNA转入此表达Cas9蛋白的灵芝菌株中，通过gRNA识别靶向基因，实现靶向基因的特定位点的中断，并以U6snRNA启动子介导gRNA内源转录，同样使靶向基因的特定位点中断。本发明以灵芝作为模式物种，提供了包含密码子优化的Cas9基因的表达载体和宿主细胞，提供了通过外源转录合成gRNA或内源U6small nuclear RNA(U6 snRNA)启动子转录合成gRNA两种方式构建CRISPR/Cas9基因组编辑的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 高等 真菌 基因 中断 方法 | ||
【主权项】：
一种用于高等真菌基因中断的方法，其特征在于，通过外源转录合成单倍体灵芝(Ganoderma lucidum，CGMCC NO.5.26)的gRNA或内源U6 snRNA启动子以体外转录或内源转录合成gRNA构建CRISPR/Cas9基因组编辑的方法。
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