[发明专利]一种大银鱼与太湖新银鱼的分子鉴别方法有效
申请号: | 201610829411.0 | 申请日: | 2016-09-18 |
公开(公告)号: | CN106399500B | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 李大命;张彤晴;潘建林;唐晟凯;刘燕山;钟立强;刘小维 | 申请(专利权)人: | 江苏省淡水水产研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;瞿网兰 |
地址: | 210017 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种大银鱼与太湖新银鱼的分子鉴别方法。一种大银鱼与太湖新银鱼的分子遗传鉴别方法,包含以下步骤:(1)分别提取待鉴定的大银鱼与太湖新银鱼基因组DNA;(2)以提取的基因组DNA为模板,PCR扩增大银鱼与太湖新银鱼的Ctyb基因;(3)扩增产物纯化后,直接测序,Cytb基因第45位点碱基是T的为大银鱼,该位点是C的为太湖新银鱼。该方法能快速、简便、准确、有效地鉴别大银鱼与太湖新银鱼,结果稳定性好,重复率高,填补了目前国内分子生物学标准鉴别大银鱼与太湖新银鱼的空白。 | ||
搜索关键词: | 银鱼 大银鱼 基因组DNA 分子鉴别 位点 鉴别 分子遗传鉴别 分子生物学 结果稳定性 扩增产物 有效地 重复率 测序 碱基 基因 填补 | ||
【主权项】:
1.一种大银鱼与太湖新银鱼的分子遗传鉴别方法,其特征在于包含以下步骤:(1)分别提取待鉴定的大银鱼与太湖新银鱼基因组DNA;(2)以提取的基因组DNA为模板,PCR扩增大银鱼与太湖新银鱼的细胞色素b基因Ctyb;用于PCR扩增大银鱼与太湖新银鱼的细胞色素b基因的上游引物为L14321:SEQ ID NO.1,下游引物为H15634:SEQ ID NO.2;(3)扩增产物纯化后,直接测序,Cytb基因第45位点碱基是T的为大银鱼,若该位点是C的为太湖新银鱼;所述的Cytb基因序列如下:ATGGCCAACCTCCGAAAAACTCACCCTTTGCTGAAAATGACTAATCACGCTTTAGTCGACCTACCTGCCCCTTCAAACCTTTCAGTTTGGTGAAACTTTGGCTCCCTTTTGGGAATCTGCCTAGTTCTCCAAATCCTAACAGGCCTATTCATGGCCATGCACTACGCCCCCGAAACCGCGAATGCATTCTCTTCTGTCGCCCACATATGTCGGGACGTCAACAACGGCTGACTAATACGCAACATGCATGCCAACGGAGCATCTTTCTTCTTCATCTGTGTTTACCTCCACATCGGCCGAGGTCTTTACTACGGCTCATACCTTTACCAAGCAACATGAAATGTTGGAGTAGTCCTTCTCCTCCTGCTAATAATAACTGCCTTTGTAGGCTACGTCCTCCCCTGAGGACAAATGTCGTTCTGAGGGGCAACAGTAATCACCAACCTCCTCTCTGCCGCCCCCTACGTGGGATTCGACCTAGTTTTATGACTATGAGGGGGGTTCTCTGTAGACAATGCCACCCTCACTCGATTCTTCGCCTTCCACTTCATTCTCCCTTTCATCATTGCCGCCGCCACTGTCATTCACCTCCTTTTCCTCCACGAAACGGGATCAAACAACCCACTTGGCCTTAGCTCAGACGTAGATAAAATCCCTTTCTTGCCATACTATATTATCAAGGACGTAGTCGGCTTCCTAGTCTTTTTCCTCGCCTTCTTCTCAATCACCCTGTTCTTCCCCAACCTCCTCGGCGACCCAGATAATTTTACAGAGGCCAACCCCCTCGTCACCCCAGCCCACATTAAACCTGAGTGGTACTTTCTTTTCGCCTACGCTATCCTCCGGTCTATTCCCAGCAAACTGGGCGGTGTTTTAGCCCTCCTCTTCTCTATCCTGGTGCTCCTTCTAGTGCCATTCCTTCACACCTCTAAACAGCAAGGCCTAGCTTTTCGCCCACTCACCCAACTACTCTTCTGGTCTCTCGTGGCTGATGTTTTTATCCTTACATGAATCGGGGGAATACCTGTAGAACACCCCTACATCGTAATTGGCCAAATTGCTTCCGTAATCTACTTCTCCATCTTCCTGATTCTTTTCCCCTTTGTAGGCTGGGCCGAAAATAAAATCCTCAAATGAGCCT。
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