[发明专利]一种简便高效的雨生红球藻营养细胞培养和采收方法有效
申请号: | 201610855813.8 | 申请日: | 2016-09-28 |
公开(公告)号: | CN106399108B | 公开(公告)日: | 2020-01-07 |
发明(设计)人: | 郑玉瑞;赵坤;代云法;王华;郑玉彬;陈树林;刘帅帅 | 申请(专利权)人: | 山东金晶生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12P23/00;C12R1/89 |
代理公司: | 11435 北京志霖恒远知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 周丹 |
地址: | 261000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,特别提供了一种简便、高效的雨生红球藻营养细胞培养和采收方法。本发明主要通过在雨生红球藻营养培养基中添加碳酸氢盐和碳酸盐缓冲液,提高培养液中二氧化碳溶解度和碳源的供给,提升藻细胞密度;在培养结束前,停止补充二氧化碳,利用藻细胞光合作用吸收碳酸氢盐的特性,破环缓冲体系,使培养液pH值自然升高,促进游动细胞鞭毛的脱落,并利用雨生红球藻细胞在高碱性环境下快速沉降的特性去除营养培养基,实现营养细胞高效采收,提升营养细胞诱导活性。该方法操作简便、效率高、能耗低,实现高效营养细胞采收的同时,提高了第二阶段虾青素诱导效率。 | ||
搜索关键词: | 雨生红球藻 营养细胞 培养液 营养培养基 碳酸氢盐 藻细胞 采收 光合作用 二氧化碳溶解度 生物技术领域 碳酸盐缓冲液 高碱性环境 细胞 高效营养 缓冲体系 细胞采收 诱导活性 沉降 游动 虾青素 二氧化碳 鞭毛 去除 能耗 诱导 升高 补充 吸收 | ||
【主权项】:
1.一种简便高效的雨生红球藻营养细胞培养和采收方法,其特征在于包括以下步骤:/na、营养培养基配制:向全营养培养基中添加10~30mM碳酸氢盐和1~5mM碳酸盐,得到营养培养基;/nb、营养培养:将雨生红球藻接种至步骤a所述的营养培养基中,得到接种后的藻液,向所述藻液中通入二氧化碳和过滤空气的混合气体,所述混合气体中二氧化碳含量为0.5~5%,维持藻液pH值在7.0~8.0;/nc、调控:营养培养结束前,停止通入二氧化碳,仅通入过滤空气,继续悬浮培养;/nd、浓缩采收:待藻液pH值上升至10~11,停止通入过滤空气,自然沉降,去除上层澄清培养基,收集下层的营养细胞,得到浓缩藻细胞;/ne、诱导培养:将上述浓缩藻细胞接种至营养缺失培养基中进行诱导培养,积累虾青素。/n
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