[发明专利]一种生产2-酮基-L-古龙酸的氧化葡萄糖酸杆菌的基因工程菌有效
| 申请号： | 201610865126.4 | 申请日： | 2016-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN106282084B | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;高媛;堵国成;李江华;康振 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12P7/60;C12R1/01 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生产2‑酮基‑L‑古龙酸的氧化葡萄糖酸杆菌的基因工程菌，属于代谢工程领域。本发明采用分子生物学手段引入sdh、sndh，并通过SH3lig和SH3支架结构使SDH和SNDH空间位置上接近并调节两酶比例，从而实现山梨醇通过氧化葡萄糖酸杆菌生产2‑KLG，简化了2‑KLG生产工艺，摇瓶水平2‑KLG产量最高可达45.39g·L‑1，具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 氧化葡萄糖酸杆菌 基因工程菌 古龙酸 酮基 分子生物学手段 代谢工程 空间位置 支架结构 山梨醇 摇瓶 生产工艺 生产 引入 应用 | ||
【主权项】：
1.一种生产2‑KLG的氧化葡萄糖酸杆菌基因工程菌，其特征在于，表达了编码山梨糖脱氢酶的基因sdh、编码山梨酮脱氢酶的基因sndh；其中，所述sdh基因3’端通过限制性酶切位点连入序列如SEQ ID NO.1所示的(GS2‑SH3lig)2得到sdh‑(GS2‑SH3lig)2，所述sndh基因5’端通过融合PCR连入SH3‑GS2得到SH3‑GS2‑sndh；所述sdh‑(GS2‑SH3lig)2由Ptuf启动子启动，SH3‑GS2‑sndh由Pdnak启动子启动；所述Ptuf、Pdnak、sdh‑(GS2‑SH3lig)2及SH3‑GS2‑sndh基因连入G.oxydans‑E.coli穿梭质粒载体pBBR1MCS‑2，然后转入宿主氧化葡萄糖酸杆菌。
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