[发明专利]一种以萝卜为原材料制备高纯度还原型萝卜硫苷的方法

摘要

本发明公开了一种以萝卜为原材料制备高纯度还原型萝卜硫苷的方法：萝卜原材料干燥，粉碎；提取剂回流提取萝卜原材料粉末；水溶解提取萝卜提取物，重复溶解提取；酸性氧化铝低压柱色谱初步纯化；亲水C‑18低压柱色谱进一步纯化，得干燥的高纯度还原型萝卜硫苷。本发明的原材料价廉易得，适用范围广，采用提取剂和水溶解提取还原型萝卜硫苷提取物，同时沉淀除去大量亲脂性杂质成分，显著提高了总体工艺产率和提取物中还原型萝卜硫苷的含量；采用酸性氧化铝低压柱吸附和亲水C‑18低压柱吸附相结合，显著提高还原型萝卜硫苷产品的纯度及收率，降低了生产成本，简化了提取纯化工艺过程，易于工业化放大生产。

主权项

1.一种以萝卜为原材料制备高纯度还原型萝卜硫苷的方法，其特征在于，是由以下步骤制备得到的：（1）将萝卜原材料干燥，粉碎，得萝卜原材料粉末；（2）以提取剂回流提取萝卜原材料粉末，过滤，收集滤液，重复回流提取，过滤除去固体杂质，收集并合并滤液，减压蒸馏回收提取剂，得干燥的萝卜提取物；（3）用水溶解提取萝卜提取物，过滤，收集滤液，重复溶解提取，过滤除去固体杂质，收集并合并滤液，减压蒸馏，得干燥的还原型萝卜硫苷提取物；（4）酸性氧化铝低压柱色谱初步纯化还原型萝卜硫苷提取物：a.将粒径为25‑250μm的酸性氧化铝浸泡于去离子水中，浸泡10‑120min，重复洗涤1‑5次，去离子水洗涤后，装填于高径比为2‑30的低压不锈钢柱中；b.将还原型萝卜硫苷提取物用去离子水溶解配制成浓度为25‑750mg/mL的溶液，5000rpm离心20min，除去固体杂质，得还原型萝卜硫苷提取物溶液；c.将还原型萝卜硫苷提取物溶液上样，进样量为每毫升酸性氧化铝上样吸附0.25‑20毫克还原型萝卜硫苷提取物，去离子水洗脱，除去不能被酸性氧化铝吸附的杂质；d.用5‑20g/L的硫酸钾‑水溶液洗脱，在流速为1‑15BV/h和检测波长为210‑245nm下，收集还原型萝卜硫苷色谱峰，减压蒸馏得到干燥的还原型萝卜硫苷和硫酸钾混合物；e.用无水甲醇搅拌浸取还原型萝卜硫苷和硫酸钾混合物，过滤除去硫酸钾固体杂质，收集并合并滤液，减压蒸馏回收甲醇，得干燥的还原型萝卜硫苷半成品；（5）亲水C‑18低压柱色谱进一步纯化：a.将粒径为10‑140μm的亲水C‑18浸泡于无水甲醇中，浸泡10‑120min，重复洗涤1‑5次，无水甲醇洗涤后，装填于高径比为2‑30的低压不锈钢柱中；b.将还原型萝卜硫苷半成品用超纯水溶解配置成10‑750mg/mL的溶液，5000rpm离心20min，除去固体杂质，得还原型萝卜硫苷半成品溶液；c.将还原型萝卜硫苷半成品溶液上样，进样量为每毫升亲水C‑18上样吸附0.1‑15毫克还原型萝卜硫苷半成品；d.超纯水洗脱，在流速为1‑15BV/h和检测波长为210‑245nm下，收集还原型萝卜硫苷色谱峰，经冷冻干燥得到干燥的高纯度4‑甲硫基‑3‑丁烯基硫代葡萄糖苷。