[发明专利]用于高通量测序的基于固相载体膜富集目标核酸的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体提供一种用于高通量测序的基于固相载体膜富集目标核酸的方法，包括1)将核酸探针文库与固相载体膜相结合形成“探针‑固相载体膜复合体”；2)向含有“探针‑固相载体膜复合体”的杂交液中加入目标核酸，进行目标核酸的富集；3)用清洗液清洗步骤2)中结合有目标核酸的“探针‑固相载体膜复合体”，然后用洗脱液从固相载体膜上洗脱、然后纯化经富集后的目标核酸文库；4)将步骤3)所富集得到的目标核酸文库应用于高通量测序。本发明可快捷地产生高倍数覆盖、单碱基位移的、用于富集目标核酸的核酸探针不可移动地固定于固相载体膜上，且本发明具有操作简便，探针获取灵活，成本低廉的特点。

主权项

一种用于高通量测序的基于固相载体膜富集目标核酸的方法，其特征在于，所述方法包括：1)将核酸探针文库通过物理、化学和/或光化学方式与固相载体膜进行结合，形成“探针‑固相载体膜复合体”；2)向含有经过预杂交或未预杂交的步骤1)所得“探针‑固相载体膜复合体”的杂交液中，加入变性后的含有接头序列和/或具有不同或相同标签核酸序列的目标核酸，或者再加入具有提高富集效率的组分，以进行目标核酸的富集；3)用清洗液清洗步骤2)中结合目标核酸的“探针‑固相载体膜复合体”，然后再用洗脱液从固相载体膜上洗脱、并纯化经富集后的目标核酸文库；4)将步骤3)所富集得到的目标核酸文库经扩增或不扩增、以制成具有接头序列和/或具有不同或相同标签核酸序列的、能用于高通量测序的目标核酸文库，即得。