[发明专利]环介导的级联放大策略用于高灵敏检测DNA甲基转移酶活性有效
| 申请号： | 201610873032.1 | 申请日： | 2016-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN107151694B | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | 姜玮;王磊;崔万玲 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/48;C12N15/11 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 董洁 |
| 地址： | 250061 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开一种环介导的级联放大策略用于高灵敏检测DNA甲基转移酶活性，基于链置换放大和指数型滚环扩增，设计了一种长茎环探针，其包括用于DNA甲基转移酶识别的甲基化位点、用于确保探针稳定的长茎部和用于引发后续放大的环部。长茎环探针中环部和小部分的茎部作为触发链用于后续的信号输出过程。该触发链被长茎部完全封闭在探针的环部，避免探针泄漏所引起的非特异性放大。长茎环探针被DNA甲基转移酶甲基化，且随后被限制性内切酶切割，产生触发链。在聚合酶和切割酶的协同作用下，所产生的触发链引发链置换放大，产生大量引物。所产生的引物引发指数滚环扩增，合成大量G‑四倍体序列，与染料相互作用而获得增强的荧光信号。 | ||
| 搜索关键词： | 环介导 级联 放大 策略 用于 灵敏 检测 dna 甲基转移酶 活性 | ||
【主权项】：
一种用于检测DNA甲基转移酶活性或抑制剂药物筛选的长茎环探针，该探针包括c长茎部和环部，其特征是：所述长茎部包括紧靠环部的缓冲区域、DNA甲基转移酶特异性识别位点序列和长茎部区域；其中所述缓冲区域的碱基对为1～7个。
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