[发明专利]新生化颗粒的质量检测方法

摘要

本发明公开了一种新生化颗粒的质量检测方法，本发明通过UHPLC‑TQ‑MS/MS测定分析，实现对新生化颗粒中的27个化学成分含量进行检测。该方法操作简便，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价新生化颗粒的质量，对控制质量和保证疗效具有重要意义。

主权项

1.一种新生化颗粒的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备分别精密称定适量的对照品，用甲醇溶解配制成以下对照品溶液：1号样品：葫芦巴碱，2号样品：盐酸水苏碱，3号样品：尿嘧啶，4号样品：原儿茶酸，5号样品：羟基红花黄色素A，6号样品：绿原酸，7号样品：苦杏仁苷，8号样品：咖啡酸，9号样品：盐酸益母草碱，10号样品：芦丁，11号样品：对香豆酸，12号样品：甘草苷，13号样品：阿魏酸，14号样品：山奈酚‑3‑O‑β‑D‑芸香糖苷，15号样品：姜酮，16号样品：异甘草苷，17号样品：洋川芎内酯I，18号样品：洋川芎内酯H,19号样品：甘草素，20号样品：槲皮素，21号样品：山奈酚，22号样品：甘草酸，23号样品：6‑姜辣素，24号样品：洋川芎内酯A，25号样品：藁本内酯，26号样品：正丁烯基苯酞和27号样品：6‑姜烯酚的混合对照品贮备液，低温条件下贮藏对照品贮备液，样品进样前，离心，取其上清液，备用；(2)供试品溶液的制备取重量比例为80:100:30:8:5:5:5的当归、益母草、川芎、桃仁、红花、炙甘草和姜炭七味药材，粉碎过筛，采用8～15倍量水提取2～3次，每次1～2h，合并水提液，离心，取上清液，经0.22μm的微孔滤膜滤过后，取续滤液作为供试品溶液，备用；(3)含量测定取步骤(1)制备得到的混合对照品贮备液，采用逐级稀释法，用体积浓度80～90％的甲醇稀释混合对照品贮备液，制成系列不同浓度的对照品溶液，然后取系列不同浓度的对照品溶液按一定的色谱条件进行UHPLC‑TQ‑MS/MS测定分析，以系列对照品溶液的浓度作为横坐标x，以测得的相应标准品的峰面积作为纵坐标y，得各对照品的线性回归方程；取步骤(2)得到的供试品溶液，按一定的色谱条件进行UHPLC‑TQ‑MS/MS测定分析，并根据各对照品的线性回归方程计算供试品溶液中各化合物的含量；所述的UHPLC‑TQ‑MS/MS测定分析的色谱分析条件为：色谱柱：规格为100mm×3mm,1.9m的Thermo Scientific Hypersil GOLD，流动相：A相为0.1％甲酸溶液和B为乙腈，流速：0.4～0.8mL/min，梯度洗脱：0～2min，5％～5％B；2～12min，5％～40％B；12～18min，40％～95％B；18～19min，95％～5％B；19～20min，5％～5％B，柱温：30～35℃，进样体积为2μL；质谱检测条件：采用多反应检测模式；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：520℃；毛细管电压：3.0kV；锥孔气流量：30L/h；碰撞气流量：0.15mL/min；脱溶剂气流量：1000L/h；取样锥孔电压及碰撞能量见下表；