[发明专利]一种热稳定性和催化活力提高的角蛋白酶突变体有效
| 申请号： | 201610909621.0 | 申请日： | 2016-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN106636042B | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 张娟;陈坚;方真;堵国成;任春慧 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12N15/57 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种热稳定性和催化活力提高的角蛋白酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的突变体为Y198F，Y291V，Y319F，A322G和A322S；其中A322S在70℃表现出最高酶活力，比P1C2T2增加将近40％。所有突变体的半衰期均大于野生型角蛋白酶KerSMD，其中A322S热稳定性最强，半衰期达到185min。本发明获得四种胞外酶催化活力明显提升的定点突变体198Y198F，Y319F，A322G和A322S，其中Y319F催化活力为最大值1558U/ml，是出发突变体P1C2T2菌株的3倍。比酶活提升明显的角蛋白酶主要有198Y198F、Y319F。因此，本发明的角蛋白酶突变体A322G的热稳定性和胞外角蛋白酶催化活力都获得明显提升，比野生型角蛋白酶更具有应用的价值和潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 角蛋白酶 突变体 催化活力 热稳定性 半衰期 野生型 定点突变体 酶工程技术 蛋白酶 基因工程 胞外酶 酶活力 菌株 酶活 外角 应用 表现 | ||
【主权项】：
1.一种角蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列是在SEQ ID NO.1的角蛋白酶P1C2T2的氨基酸序列的基础上，将第198位的酪氨酸突变成苯丙氨酸、将第291位的酪氨酸突变成缬氨酸、将第319位的酪氨酸突变成苯丙氨酸、将第322位的丙氨酸突变成甘氨酸或者将第322位的丙氨酸突变成丝氨酸。
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