[发明专利]一种乳制品中双酚类化合物的快速定量检测方法

摘要

本发明涉及一种乳制品中双酚类化合物的快速定量检测方法，其包括以下步骤样品处理及检测过程及制作标准曲线的过程，并样品处理及检测过程中得到的检验数据通过标准曲线计算待测样品中双酚类化合物的浓度。该检测方法采用HPLC‑MS/MS法，能同时利用液相色谱的高分离能力和质谱的高灵敏度鉴定能力对乳制品中的多种双酚类化合物进行分离和鉴定，分离效率高，鉴定准确；可将21种双酚类化合物进行分离定性及定量，且提取的双酚类化合物的回收率较高，可有效地用于乳制品中双酚类化合物的筛选。

主权项

一种乳制品中双酚类化合物的快速定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品处理及检测将待测乳制品置于具塞比色管中，加入提取溶剂、硫酸镁和乙酸钠，经涡旋后静置，取上清液转移至另一个比色管中，加入硫酸镁和N‑丙基乙二胺和C18净化，经涡旋后静置，取上清液氮吹近干，并用甲醇和水复溶，经涡旋后过滤膜，取过滤后的液体进样至HPLC‑MS/MS中检测分析,其中,在提取过程中，所述提取溶剂为含有体积分数为1％乙酸的乙腈，含有体积分数为1％乙酸的乙腈的添加量满足每克乳制品中加入2.5‑3.5ml，硫酸镁的添加量满足硫酸镁与乳制品的质量比为0.6‑1:1，乙酸钠的添加量满足乙酸钠与乳制品的质量比为0.2‑0.4:1；在净化上清液的过程中，硫酸镁的添加量满足每毫升上清液加入硫酸镁的质量为6‑10mg，N‑丙基乙二胺的添加量满足每毫升上清液加入N‑丙基乙二胺的质量为30‑40mg，C18的添加量满足每毫升上清液加入15‑25mg，其中，流动相：A相：水，B相:甲醇，流动相梯度洗脱程序如下所示：表2(2)制作标准曲线将多种双酚类化合物标准品分别置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容，配制成单标储备液；取相同体积的各双酚类化合物的单标储备液进行混合，并加甲醇和水稀释成中间液，再取中间液加甲醇和水稀释，配制成多种浓度的混合标准工作液，注入HPLC‑MS/MS上测定，得到多种双酚类化合物的标准曲线,其中,HPLC‑MS/MS中采用的色谱柱为Agilent ZORBAX SB C18柱或ACOUITY UPLC BEH C18柱；(3)测定样品中双酚类化合物的浓度将样品处理及检测过程中得到的检验数据通过标准曲线计算待测样品中双酚类化合物的浓度,其中，所述双酚类化合物包括双酚A、双酚B、双酚F、四溴双酚A、双酚F缩水甘油醚、双酚F双(2,3‑二羟基丙基)醚、双酚F‑双(2‑氯‑1‑丙醇)醚、六氟双酚A、双酚Z、双酚A缩水甘油醚、双酚C、双酚Z、双酚AP、双酚S、四氯双酚A、双酚A(2,3‑二羟基丙基)缩水甘油醚、双酚A二(2,3‑二羟基丙基)醚、双酚A(3‑氯‑2‑羟丙基)缩水甘油醚、双酚A二(3‑氯‑2‑羟丙基)醚、双酚A(3‑氯‑2‑羟丙基)(2,3‑二羟基丙基)醚及4,4’‑磺酰二(2‑甲基苯酚)。