[发明专利]一种pH不敏感荧光蛋白标记的生物组织的荧光控制方法有效
申请号: | 201610967343.4 | 申请日: | 2016-10-31 |
公开(公告)号: | CN106525791B | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 刘秀丽;周宏福;刘灵;吕晓华;曾绍群 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 许恒恒 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种红色荧光蛋白DsRed标记生物组织的荧光控制方法,采用含有过渡金属离子的淬灭化学试剂将红色荧光蛋白标记的生物组织荧光蛋白淬灭,得到荧光淬灭的生物组织;采用含有金属离子螯合剂的重激活化学试剂将荧光淬灭的生物组织的荧光重激活,本发明利用过渡态金属离子和氢离子的协同作用将红色荧光蛋白标记的生物组织荧光蛋白淬灭,利用金属离子螯合剂和氢氧根离子的协同作用将荧光淬灭的生物组织的荧光重激活,实现DsRed标记的生物组织的荧光的精确控制,淬灭彻底完全,激活方便,效果好,对比度高;该方法可以应用于生物组织的层析成像,荧光淬灭完全,成像时不存在背景荧光干扰的问题。 | ||
搜索关键词: | 生物组织 荧光 荧光淬灭 淬灭 红色荧光蛋白 激活 金属离子螯合剂 化学试剂 荧光蛋白 氢离子 过渡态金属离子 过渡金属离子 荧光蛋白标记 氢氧根离子 背景荧光 标记生物 层析成像 不敏感 成像 应用 | ||
【主权项】:
1.一种红色荧光蛋白DsRed标记生物组织的荧光控制方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)荧光淬灭:采用淬灭化学试剂将红色荧光蛋白DsRed标记的生物组织的荧光淬灭,得到荧光淬灭的生物组织,所述淬灭化学试剂包括过渡态金属离子,所述淬灭化学试剂的pH为3~6;所述淬灭化学试剂为过渡态金属离子化合物的水溶液和酸的混合溶液;(2)荧光重激活:采用重激活化学试剂将步骤(1)所述的荧光淬灭的生物组织的荧光重激活,所述重激活化学试剂包括金属离子螯合剂,所述重激活化学试剂的pH为10~13;所述重新激活后的荧光强度最高是淬灭状态的荧光强度的20倍以上。
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