[发明专利]高茶氨酸茶树资源快速筛选方法

摘要

本发明公开了一种高茶氨酸茶树资源快速筛选的方法。茶树茶氨酸占其氨基酸总量的40%‑70%，高茶氨酸茶树资源其茶氨酸含量大于其干重的2.5%。通过酶标仪利用96孔板筛选茶树氨基酸含量≥3.57%的资源作为候选资源，并利用液相色谱进一步测定其茶氨酸含量来进行快速筛选。本发明具有通量高、快速而准确的优点。

主权项

1.一种高茶氨酸茶树资源快速筛选方法，其特征在于，步骤如下：S1.候选资源的筛选：利用96孔板酶标仪法，先筛选出氨基酸含量高的茶树资源，将其作为候选资源；S2.高茶氨酸茶树资源筛选：利用OPA柱前衍生‐HPLC法测定候选资源中茶氨酸含量，根据茶氨酸含量高低来筛选出高茶氨酸茶树资源；所述候选资源的筛选，具体步骤如下：S11.L‐谷氨酸标准曲线的绘制：准确称量谷氨酸配制成母液，并配制成不同浓度梯度的工作液用于绘制L‐谷氨酸标准曲线；S12.茶汤的制备：将茶叶研磨成茶粉，准确称量0.1g样品于10ml的离心管中，用移液管加入10ml的100℃水，混匀后置于100℃水浴锅中加热45min，每隔10min混匀一次；冷却至室温，低速离心后用1ml移液器抽取上清过0.22um滤膜至2mlEP管中备用；S13.测定吸光值：取1mlS12中备用的茶汤或S11中L‐谷氨酸工作液、0.5mlpH8.0的磷酸缓冲液及茚三酮溶液于2ml的EP管中混匀，置于100℃水浴锅中加热15min，期间每隔3min混匀一次；冷却后，取20ul反应液于96孔酶标板上，并加入230ul水，利用酶标仪测吸光值；S14.氨基酸含量的计算：根据茶汤氨基酸的吸光值，对照L‐谷氨酸标准曲线推算出氨基酸含量，选出氨基酸含量高的资源即可。