[发明专利]一种测定Hg2+浓度的荧光分析方法

摘要

本发明涉及一种测定Hg²⁺浓度的荧光分析方法，属分析检测技术领域，包括以下步骤：首先选两条长度不等且同时富含T和G两种碱基的非标记单链DNA分子，分别配制成溶液，水浴处理后备用；将所得两种溶液、硫代黄素溶液和Tris‑HNO₃缓冲液进行混合，得混合液；在混合液中加入Hg²⁺，室温震荡30min，在450 nm下测定荧光强度值，根据测定的荧光强度值计算Hg²⁺的浓度。该方法是基于Hg²⁺诱导的免标记DNA分子的双链/G‑四链体自组装及ThT嵌入双链DNA和G‑四链体后荧光剧烈增强，不仅避免了复杂的DNA荧光标记过程，实现荧光信号双重放大，操作简单，成本低廉，特异性好且灵敏度高。

主权项

1.一种测定Hg²⁺浓度的荧光分析方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、选取两条长度不等且均富含T和G两种碱基的非标记单链DNA分子A和B，分别配制成溶液A和溶液B，将两种溶液分别于90℃水浴5 min，冷却至室温，备用；所述非标记单链DNA分子A和B均在分子链的一端富T，另一端富G；所述非标记单链DNA分子A和B中的G碱基数的比为4:8，非标记单链DNA分子A和B的匹配长度为7‑10个连续的T碱基；步骤二、将所得溶液A、溶液B与硫代黄素溶液进行混合，得混合物Ⅰ；将混合液Ⅰ与Tris‑HNO₃缓冲液进行混合，得混合液Ⅱ；其中混合液Ⅱ中非标记单链DNA分子A的摩尔浓度为0.5‑1.5μmol/L，非标记单链DNA分子B的摩尔浓度为0.5‑1.5μmol/L，硫代黄素的摩尔浓度为2μmol/L；步骤三、向混合液Ⅱ中加入Hg²⁺，使混合液Ⅱ中Hg²⁺浓度为0.3 ‑ 4µmol/L；将加入Hg²⁺的混合液Ⅱ置于室温下震荡30min，然后在450 nm激发波长下测定荧光强度值，根据测定的荧光强度值计算Hg²⁺的浓度。