[发明专利]一种构建组织工程角膜缘的方法有效
| 申请号： | 201611044670.9 | 申请日： | 2016-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN106729999B | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 周庆军;董沐晨;史伟云;杨玲玲;段豪云 | 申请（专利权）人： | 山东省眼科研究所 |
| 主分类号： | A61L27/36 | 分类号： | A61L27/36;A61L27/38;A61L27/50 |
| 代理公司： | 11569 北京高沃律师事务所 | 代理人： | 王加贵<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物工程医疗材料领域，公开了一种构建组织工程角膜缘的方法，包括以下步骤：将含前弹力层的新鲜猪角巩膜缘基质置于添加了去垢剂和核酸酶的脱细胞角膜缘保护液中进行震荡脱细胞处理；将所述脱细胞后的角膜缘置于脱细胞角膜缘保护液中漂洗，得到脱细胞角膜缘；将种子细胞接种在所述脱细胞角膜缘上进行体外扩增，当种子细胞在脱细胞角膜缘上扩增达到3～5层时，得到组织工程角膜缘。其中，所述脱细胞角膜缘保护液为含有5～12g/L透明质酸、5～20g/L硫酸软骨素、3～10g/L右旋糖酐和2.5～5mg/L妥布霉素的PBS缓冲液。本发明的组织工程角膜缘材料可替代人角膜缘。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 组织 工程 角膜 方法 | ||
【主权项】：
1.一种构建组织工程角膜缘的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将含前弹力层的新鲜猪角巩膜缘基质置于添加了去垢剂和核酸酶的脱细胞角膜缘保护液中进行震荡脱细胞处理；/n(2)将所述脱细胞后的角膜缘置于脱细胞角膜缘保护液中漂洗，得到脱细胞角膜缘；/n(3)将种子细胞接种在所述脱细胞角膜缘上进行体外扩增，行气液界面培养，当种子细胞在脱细胞角膜缘上扩增达到3～5层时，得到组织工程角膜缘；/n其中，所述脱细胞角膜缘保护液为含有5～12g/L透明质酸、5～20g/L硫酸软骨素、3～10g/L右旋糖酐和2.5～5mg/L妥布霉素的PBS缓冲液；/n所述种子细胞为口腔黏膜上皮细胞和/或干细胞、或hES分化的角膜上皮细胞和/或干细胞；所述种子细胞接种到所述脱细胞角膜缘上的细胞密度为1～5×104/cm2；/n所述种子细胞体外扩增的条件为：条件培养基，扩增温度为37℃，CO2体积浓度为5％，静置培养。/n
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