[发明专利]一种用于肌氨酸的电化学检测方法有效

专利信息
申请号: 201611080806.1 申请日: 2016-11-30
公开(公告)号: CN106596693B 公开(公告)日: 2019-03-29
发明(设计)人: 樊春海;左小磊;宋萍 申请(专利权)人: 中国科学院上海应用物理研究所
主分类号: G01N27/48 分类号: G01N27/48;G01N27/26;C12Q1/28;C12Q1/26
代理公司: 上海智信专利代理有限公司 31002 代理人: 邓琪;宋丽荣
地址: 201800 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种用于肌氨酸的电化学检测方法,包括:利用物理吸附或者化学偶联的方法将肌氨酸氧化酶和第一核酸序列连接;将过氧化物酶和第二核酸序列连接;提供第一核酸纳米结构,其上伸出第一识别序列;提供第二核酸纳米结构,其上伸出第二识别序列;第一核酸序列修饰酶与第一识别序列杂交,得到肌氨酸氧化酶和核酸纳米结构的第一复合体,第二核酸序列修饰酶与第二识别序列杂交,得到过氧化物酶和核酸纳米结构的第二复合体;将第一复合体和第二复合体组装到电化学装置的工作电极表面,进行电化学检测。根据本发明的电化学检测方法将结构核酸纳米技术、酶催化反应和电化学生物传感器相结合,实现了对肌氨酸小分子的定量检测。
搜索关键词: 一种 用于 氨酸 电化学 检测 方法
【主权项】:
1.一种用于肌氨酸的电化学检测方法,其特征在于,所述电化学检测方法包括如下步骤:S1,利用物理吸附或者化学偶联的方法将肌氨酸氧化酶SOX和第一核酸序列连接,得到第一核酸序列修饰酶;将过氧化物酶Peroxidase和第二核酸序列连接,得到第二核酸序列修饰酶;S2,提供第一核酸纳米结构,其上伸出第一识别序列;提供第二核酸纳米结构,其上伸出第二识别序列;S3,第一核酸序列修饰酶与第一识别序列杂交,得到肌氨酸氧化酶SOX和核酸纳米结构的第一复合体;第二核酸序列修饰酶与第二识别序列杂交,得到过氧化物酶Peroxidase和核酸纳米结构的第二复合体;S4,将第一复合体和第二复合体组装到电化学装置的工作电极表面,利用第一复合体中的肌氨酸氧化酶SOX催化肌氨酸生成双氧水,利用第二复合体中的过氧化物酶Peroxidase催化酶催化底物TMB和双氧水的电化学反应,产生电流信号进行电化学检测;所述步骤S1包括:S11,将3‑(2‑吡啶二巯基)丙酸N‑羟基琥珀酰亚胺酯SPDP和肌氨酸氧化酶SOX、过氧化物酶Peroxidase进行连接,得到SPDP活化酶;S12,将SPDP活化酶和巯基核酸序列进行反应,得到核酸序列修饰酶,其中,巯基核酸序列是利用巯基对序列为SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的核酸进行修饰的DNA链。
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