[发明专利]一种小麦单倍体胚生试管苗的培养方法

摘要

本发明公开了一种小麦单倍体胚生试管苗的培养方法，包括以下步骤：小麦单倍体胚生试管苗长至2‑3片叶，转入壮苗用培养箱进行壮苗培养；壮苗用培养箱中50%的试管苗达到三叶期时，进行壮苗培养；在壮苗培养2‑3周后，添加营养补给液；培养至试管苗产生2‑3个分蘖时，转入越夏用培养箱进行越夏培养，添加营养补给液；10月下旬到11月上旬，恢复至壮苗用培养箱的培养条件，田间气温降至15℃以下时，进行移栽炼苗，炼苗2‑3天后，露地移栽。本方法通过在不同阶段添加营养补给液，可实现小麦单倍体试管苗一步形成壮苗，简单有效地缓解试管苗的越夏衰亡，提高了试管苗的存活率和出瓶移植的成活率，间接提高了单倍体苗的加倍效率。

主权项

1.一种小麦单倍体胚生试管苗的培养方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：（1）当小麦单倍体胚生试管苗长至2‑3片叶、有根时，转入温度、光照强度、光照时长可设定的壮苗用培养箱进行壮苗预培养；（2）壮苗用培养箱中50%的试管苗达到三叶期时，将此试管苗转移至壮苗培养基中，培养瓶灼烧后封口，置于壮苗用培养箱内进行壮苗培养；（3）壮苗培养2‑3周后，向培养瓶中无菌添加1号营养补给液，培养瓶灼烧后封口，置于壮苗用培养箱内继续进行壮苗培养，以后每隔2周向培养瓶内添加与1号营养补给液体积相同的2号营养补给液；（4）试管苗产生2‑3个分蘖时，转入温度、光照强度、光照时长可调节的越夏用培养箱进行越夏培养，每2周向培养瓶内无菌添加2号营养补给液；（5）10月下旬到11月上旬，将试管苗的培养箱培养条件恢复至壮苗用培养箱的培养条件，并准备试管苗移栽用地；（6）移栽用地准备好后，田间气温降至15℃以下时，试管苗进行移栽前炼苗，每天向培养瓶内无菌添加2次2号营养补给液；（7）炼苗2‑3天后，以2号营养补给液做为移栽定根水，进行试管苗的露地移栽；其中，1号营养补给液的配置方法为：将硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾用水溶解，加入用95%乙醇溶解的多效唑，其中，硝酸铵 1650 mg/L、硝酸钾1900 mg/L、磷酸二氢钾 170 mg/L、多效唑0.5 mg/L，调节pH值至5.6‑5.8，灭菌，4℃下保存期限为2周；2号营养补给液的配置方法为：将硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾用水溶解，其中，硝酸铵 1650 mg/L、硝酸钾1900 mg/L、磷酸二氢钾 170 mg/L，调节pH值至5.6‑5.8，灭菌，4℃下保存期限为2周；壮苗培养基的配方为MS大量元素、MS微量元素、MS铁盐、MS有机物质、多效唑0.5 mg/L、蔗糖30g/L，琼脂6.5 g/L，pH值5.6‑5.8。