[发明专利]一种褐纹报春苣苔的离体培养方法

摘要

本发明公开了一种褐纹报春苣苔的离体培养方法，包含如下步骤：步骤一、春季取褐纹报春苣苔的幼嫩叶片，清洗、消毒后将处理后的叶片接入初代培养基上，培养14d；步骤二、将步骤一培养后的无菌叶片切片，接入不定芽诱导培养基中，培养15‑18d；步骤三、将步骤二获得的不定芽转接到继代培养基中培养25‑30d；步骤四、将步骤三获得的组培小苗转接于生根培养基中培养18‑20d；步骤五、将步骤四获得的生根苗炼苗4‑5d，栽到基质中，培养7‑10d。本发明的褐纹报春苣苔的离体培养方法操作简单，设计合理，具有繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，能保持原有品种的优良性状，不受季节的限制的优点。

主权项

1.一种褐纹报春苣苔的离体培养方法，其特征在于，包含如下步骤：步骤一、外植体的消毒灭菌，春季取褐纹报春苣苔的幼嫩叶片，清洗、消毒然后切去少量叶片的边缘，然后将处理后的叶片接入初代培养基上，培养14d；步骤二、不定芽的诱导，将步骤一培养后的无菌叶片切成1cm×1cm大小，并将叶片的边缘切去少量，接入不定芽诱导培养基中，培养15‑18d，形成不定芽；所述不定芽诱导培养基为MS+TDZ1.0‑2.0mg/L+NAA0.01‑0.1mg/L+卡拉胶6.0g/L，并调节pH6.4；步骤三、继代培养，将步骤二获得的不定芽转接到继代培养基中培养25‑30d，形成组培小苗；步骤四、生根培养，将步骤三获得的组培小苗转接于生根培养基中培养18‑20d，获得生根苗；步骤五、炼苗移栽，将步骤四获得的生根苗移出培养室后揭盖在自然条件下炼苗4‑5d，然后洗净培养基移栽到基质中；浇透定根水后，将移栽小苗置于有遮阳网的荫棚下，早晚浇水一次，培养7‑10d；所述步骤三中继代培养基为1/2MS+KT0.5‑1.5mg/L+IBA0.05mg/L+活性炭0.2g/L+卡拉胶6.0g/L并调节pH6.4；所述步骤四中生根培养基为1/4MS+NAA0.1‑0.3mg/L+活性炭0.1‑0.3g/L+卡拉胶6.0g/L并调节pH6.4。