[发明专利]一种广州管圆线虫体外培养基和体外培养方法

摘要

本发明提供一种广州管圆线虫体外培养基，包括虫卵培养基、I期幼虫培养基、III期幼虫培养基、IV期幼虫培养基和V期幼虫培养基，这些培养基中均含有两性霉素B；通过在广州管圆线虫培养中加入两性霉素，可防止体外培养广州管圆线虫的污染，通过将已感染广州管圆线虫60d的大鼠进行解剖处理，挑出血管内的成虫，将成虫清洗后放入虫卵培养基中孵育，孵育一段时间后，挑出成虫，剩余的虫卵置于培养箱中培养7～10d，80%的虫卵可成功发育为I期幼虫，且体外培育的I期幼虫，III期幼虫，IV期幼虫，V期幼虫均可在体外长期存活，本发明的研究为广州管圆线虫的体外研究和应用提供了有效的技术保障。

主权项

1.一种广州管圆线虫体外培养基，其特征在于，所述培养基包括虫卵培养基、I期幼虫培养基、III期幼虫培养基、IV期幼虫培养基和V期幼虫培养基，所述虫卵培养基、I期幼虫培养基、III期幼虫培养基、IV期幼虫培养基和V期幼虫培养基中均含有两性霉素B；所述虫卵培养基包含Ham’s F‑12培养基和0.1％复合抗生素；所述I期幼虫培养基包含DMEM基础培养基、0.1％的5mg/ml胆固醇乙醇溶液、20％胎牛血清、1％螺组织提取液和0.1％复合抗生素；所述III期幼虫培养基、IV期幼虫培养基、V期幼虫培养基均包含Waymouth’s培养基、20％胎牛血清和0.1％复合抗生素；所述复合抗生素含有青霉素G钾、硫酸链霉素和两性霉素B，青霉素G钾的终浓度为100,000units/ml，硫酸链霉素的终浓度为50mg/ml，两性霉素的终浓度为0.5mg/ml。