[发明专利]一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法有效
申请号: | 201611123580.9 | 申请日: | 2016-12-08 |
公开(公告)号: | CN107064492B | 公开(公告)日: | 2019-04-23 |
发明(设计)人: | 刘自立;马贵军;石海芳;俞爱敏;姬明放 | 申请(专利权)人: | 申联生物医药(上海)股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法,包括以下步骤:将口蹄疫合成肽疫苗破乳,将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测;所述破乳方法为:将口蹄疫合成疫苗与破乳剂混合,分层后得水相抗原样品;所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物,所述有机溶剂选自乙腈、正丁醇、苯甲醇、丁基二乙二醇、乙醇中的一种,所述酸选自盐酸、乙酸、甲酸、三氟乙酸中的一种。本发明提供的破乳方法破乳能力更强,使样品无需进行纯化处理即可测定,缩短了检测时间;本发明采用竞争ELISA方法进行定性定量检测抗原浓度,得到的标准曲线斜率会大于常规间接竞争法,从而大大提高了检测灵敏度。 | ||
搜索关键词: | 破乳 定量检测 定性 油佐剂疫苗 竞争ELISA 抗原样品 有机溶剂 破乳剂 口蹄疫 乙酸 标准曲线斜率 检测灵敏度 纯化处理 二乙二醇 合成疫苗 间接竞争 三氟乙酸 苯甲醇 合成肽 混合物 正丁醇 抗原 乙醇 丁基 分层 甲酸 酸选 乙腈 盐酸 疫苗 检测 | ||
【主权项】:
1.一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:将口蹄疫合成肽疫苗破乳,将破乳后的抗原样品采用竞争ELISA方法进行定性定量检测;所述破乳方法为:将口蹄疫合成疫苗与破乳剂混合,分层后得水相抗原样品;所述破乳剂包括有机溶剂与酸的混合物;所述破乳剂中有机溶剂选用乙腈,酸选用三氟乙酸,乙腈与三氟乙酸的体积比为100:0.05;或者,所述破乳剂中有机溶剂选用乙醇,酸选用盐酸,乙醇与盐酸的体积比为100:0.33;油佐剂疫苗与破乳剂按体积比9:1~5:5进行混合。
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