[发明专利]基于微滴和纳米荧光探针的胞内蛋白检测方法有效
| 申请号： | 201611149908.4 | 申请日： | 2016-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN106596487B | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 张涛;黎海文;蒋克明;周武平;刘聪 | 申请（专利权）人： | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 韩飞 |
| 地址： | 215163 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本案涉及基于微滴和纳米荧光探针的胞内蛋白检测方法，其将待测细胞悬液加入到微流控芯片的第一样品孔，将纳米荧光探针复合物和细胞裂解液加入到第二样品孔，将流动相加至流动相孔，驱动待测细胞悬液、纳米荧光探针复合物、细胞裂解液和流动相进入微流控管道，在流体剪切力作用下生成油包水微滴；在37℃孵育20‑60min，使待测细胞悬液中的细胞裂解后释放出胞内蛋白并与纳米荧光探针复合物结合；采用数字PCR系统或荧光拍照检测微滴的荧光强度，从而测出胞内蛋白的含量。本案无需常规流式细胞术和免疫荧光检测方法中的固定、打孔破膜，避免了抗原结合位点损失，简化了操作步骤、提高了检测灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 纳米 荧光 探针 蛋白 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于微滴和纳米荧光探针的胞内蛋白检测方法，其特征在于，包括：1)制备纳米荧光探针复合物；2)将待测细胞悬液加入到微流控芯片的第一样品孔，将所述纳米荧光探针复合物和细胞裂解液加入到所述微流控芯片的第二样品孔，将流动相加至所述微流控芯片的流动相孔，驱动待测细胞悬液、纳米荧光探针复合物、细胞裂解液和流动相进入所述微流控芯片的微流控管道，并在流体剪切力作用下生成油包水微滴，待测细胞悬液中的细胞、纳米荧光探针复合物和细胞裂解液均被包裹在微滴中，每个微滴中的细胞数量不超过1个；3)在37℃孵育20‑60min，使微滴中的细胞裂解后释放出胞内蛋白并与纳米荧光探针复合物结合；4)采用数字PCR系统或荧光拍照检测微滴的荧光强度，从而测出胞内蛋白的含量。
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