[发明专利]一种基于中华蜜蜂气味结合蛋白的嗅觉活性剂筛选方法在审
| 申请号： | 201611182099.7 | 申请日： | 2016-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN106834296A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 李红亮;张林雅;吴帆 | 申请（专利权）人： | 中国计量大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/70;C07K14/435;C07K1/22;G01N21/64 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙)33213 | 代理人： | 杜立 |
| 地址： | 310018 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于中华蜜蜂气味结合蛋白的植物花香气味嗅觉活性剂配方筛选方法包括以下工艺步骤1)提取中华蜜蜂工蜂采集蜂触角总RNA；2)设计中华蜜蜂气味结合蛋白基因引物，通过RT‑PCR获得中华蜜蜂气味结合蛋白基因全长；3)构建中华蜜蜂气味结合蛋白基因的原核表达载体；4)通过IPTG诱导中华蜜蜂重组气味结合蛋白重组表达，并通过镍琼脂糖凝胶亲和层析柱对其进行纯化；5)通过竞争性荧光结合方法获得中华蜜蜂重组气味结合蛋白与植物花香气味的结合反应谱，解离常数KD低于20μmol/L以下时，确定为适合中华蜜蜂的植物花香气味嗅觉活性剂。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 中华 蜜蜂 气味 结合 蛋白 嗅觉 活性剂 筛选 方法 | ||
【主权项】：
基于中华蜜蜂气味结合蛋白的植物花香气味嗅觉活性剂配方筛选方法，其特征在于包括以下工艺步骤：1)提取中华蜜蜂工蜂采集蜂触角总RNA；2)设计中华蜜蜂气味结合蛋白基因引物，通过RT‑PCR获得中华蜜蜂气味结合蛋白基因全长；3)构建中华蜜蜂气味结合蛋白基因的原核表达载体；4)通过IPTG诱导中华蜜蜂重组气味结合蛋白重组表达，并通过镍琼脂糖凝胶亲和层析柱对其进行纯化；5)通过竞争性荧光结合方法获得中华蜜蜂重组气味结合蛋白与植物花香气味的结合反应谱，解离常数KD低于20μmol/L以下时，确定为适合中华蜜蜂的植物花香气味嗅觉活性剂。
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