[发明专利]检测可逆性阻断dNTP中非阻断杂质含量的方法和试剂盒有效
| 申请号： | 201611208173.8 | 申请日： | 2016-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN108239669B | 公开（公告）日： | 2021-03-16 |
| 发明（设计）人： | 龚梅花;王静静;罗银铃;罗宇芬;李长英;陈奥;徐崇钧;章文蔚 | 申请（专利权）人： | 深圳华大智造科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 孙银行;彭家恩 |
| 地址： | 518083 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测可逆性阻断dNTP中非阻断杂质含量的方法和试剂盒，该方法包括：(a)获取至少一装载有核酸的芯片和至少一已知序列，该已知序列与核酸上的部分序列互补；形成互补后，核酸在沿已知序列的延伸方向上紧接有两个特异的待测碱基，第一个碱基与待检测的可逆性阻断dNTP互补，第二个碱基与带荧光的dNTP互补；(b)在DNA聚合酶的作用下，首先至少加入待检测的可逆性阻断dNTP，使已知序列延伸一个碱基；然后加入带荧光的dNTP，使至少部分序列继续延伸一个碱基；(c)采集反应后产物的荧光信号，并根据荧光信号的强度推算出待检测的可逆性阻断dNTP中非阻断杂质的含量。本发明的方法能够进一步评估可逆性阻断dNTP的纯度，并且精确度更高。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 可逆性 阻断 dntp 中非 杂质 含量 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种检测可逆性阻断dNTP中非阻断杂质含量的方法，其特征在于，所述方法包括：(a)获取至少一装载有核酸的芯片和至少一已知序列，该已知序列与所述核酸上的部分序列互补；形成互补后，所述核酸在沿所述已知序列的延伸方向上紧接有两个特异的待测碱基，第一个碱基与待检测的可逆性阻断dNTP互补，第二个碱基与带荧光的dNTP互补；(b)在DNA聚合酶的作用下，首先至少加入所述待检测的可逆性阻断dNTP，使所述已知序列以所述核酸为模板延伸一个碱基；然后加入所述带荧光的dNTP，使延伸一个碱基后的序列中的至少部分序列继续延伸一个碱基；(c)采集反应后的产物的荧光信号，并根据所述荧光信号的强度推算出所述待检测的可逆性阻断dNTP中非阻断杂质的含量。
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