[发明专利]一种杂交不育黄姑鱼的生产方法

摘要

本发明公开了一种杂交不育黄姑鱼的生产方法，分别以箕作黄姑鱼为母本，银姑鱼为父本，促进其性腺同步成熟；挑选性腺发育良好的箕作黄姑鱼和银姑鱼亲鱼，注射用促黄体素释放激素A2对箕作黄姑鱼进行人工催产；采集箕作黄姑鱼卵子和银姑鱼精子，进行干法受精；杂交仔、稚、幼鱼培育和性腺观察。采用杂交的方法培育性腺不育的黄姑鱼，培育出的黄姑鱼具有成活率高、抗逆性强、完全不育等特点，该方法具有简单易行的优点，杂交不育的黄姑鱼在养殖生产中具有较好的推广应用前景，而且可以作为人工“代孕”的受体，具有非常重要的应用价值。

主权项

1.一种杂交不育黄姑鱼的生产方法，其特征在于该方法包括以下步骤：/n（1）亲鱼的培育/n选择箕作黄姑鱼雌鱼和银姑鱼雄鱼作为亲鱼，分别对箕作黄姑鱼和银姑鱼进行营养强化和光温调控，促进其性腺同步成熟；培育时采用升温培育，水温由18℃逐渐升到24℃；在亲鱼培育池中挑选性腺发育较好的亲本，挑选后的亲本置于黑布遮住桶中，保持培育水温为22—24℃；/n（2）雌性箕作黄姑鱼的人工催产/n对雌性箕作黄姑鱼进行催产，选用注射用促黄体素释放激素A2作为催产剂，注射剂量为1kg亲本注射1.5-2μg催产素，亲本的培育温度为24℃时催产效应时间为28-32h；对箕作黄姑鱼采用人工挤压腹部法采卵；/n（3）人工采集银姑鱼精液/n采用人工挤压腹部法采集银姑鱼精液，用经消毒的干燥玻璃滴管吸取干净精液，保存于1.5 mL离心管中，置于冰上；/n（4）箕作黄姑鱼♀×银姑鱼♂人工杂交/n将箕作黄姑鱼采用人工挤压腹部法采集的鱼卵，放入干燥烧杯中；将采集的银姑鱼的新鲜精液滴入未受精的鱼卵中，干法受精，用适量海水激活后搅动使其充分混匀，然后加入2-5倍于卵量体积的海水完成受精过程；/n（5）受精卵孵化/n将受精卵放入500L玻璃水槽中孵化，水温为24℃，盐度28～32‰，pH8.0～8.2，静水微充气；/n（6）杂交苗的培育/n受精卵孵化后进行杂交苗的培育，培育分为仔鱼期、稚鱼期、幼鱼期，培育水温为20～24℃，盐度28～32‰，pH8.0～8.2，换水量和充气量随鱼苗生长而逐渐增大；苗种培育采用的饵料依次为轮虫、卤虫无节幼体、配合饲料；/n（7）检验杂交苗不育的成功率/n待杂交苗培育至3月龄时，随机抽取30尾，解剖后取性腺，性腺均呈现细线状；将性腺采用波恩式液固定12h后换采用70%酒精保存；将性腺样品脱水、石蜡包埋后进行组织切片，切片后的性腺形态有精小叶结构，但无配子发生，故鉴定为性腺完全不育。/n