[发明专利]一种多通道荧光相关光谱的多聚体检测数据处理方法

摘要

本发明涉及一种多通道荧光相关光谱的多聚体检测数据处理方法，通过将脉冲激光器、多个单光子检测器、时间相关单光子计数器与共聚焦荧光显微镜联合，建立数学模型定量分析溶液中的聚集体浓度。该数据处理方法基于单分子荧光的反聚束效应(anti‑bunching)，即当激发脉冲的时间短于荧光分子中电子从第一电子激发态跃迁到基态所需的时间时，单个荧光分子在该脉冲下发射的光子数不可能大于一个，因此每个脉冲内检测到的光子数与共聚焦微区内的荧光分子数及聚集度密切相关。本发明通过记录一段时间内检测到的多光子流数据，统计单个脉冲、连续多个脉冲下不同光子数的概率，并构建与多聚体物种浓度相关的理论模型，从而定量获得多聚体系中各物种的浓度分布信息。

主权项

1.一种多通道荧光相关光谱的多聚体检测数据处理方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)从原始光子流数据中分别统计单脉冲发n个光子的频数分布Nn‑raw、连续双脉冲第一个脉冲发i个光子，第二个脉冲发j个光子的频数分布Nij‑raw；(2)将从原始光子流数据统计得到的频数分布作去检测器影响处理，得到单脉冲真实发光光子数频数分布Nn‑true和连续双脉冲真实发光光子数频数分布Nij‑true；(3)对真实发光光子数频数分布利用总累积测量时间t和激发光频率f进行归一化计算，得到单脉冲发光概率pn‑pulse和双脉冲发光概率pij‑pulse；(4)求解单脉冲发光概率pn‑pulse和双脉冲发光概率pij‑pulse与多聚体物种浓度c联立所得方程组，从而获得多聚体系中各物种的浓度分布信息。