[发明专利]一种快速稳定的Tn5转座酶酶活测定方法在审
| 申请号： | 201611250704.X | 申请日： | 2016-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN108265101A | 公开（公告）日： | 2018-07-10 |
| 发明（设计）人： | 王磊;王亮;郑春阳 | 申请（专利权）人： | 天津强微特生物科技有限公司;华北理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300384 天津市南开*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速稳定的Tn5转座酶酶活测定方法，包括以下步骤：（1）测活底物同转座酶和反应缓冲液混合（2）进行转座反应（3）加入变性剂（如SDS、盐酸胍等）使转座酶变性，分离转座酶和DNA片段（4）加入够识别底物标记的介质，结合未反应的底物（5）通过选择性手段（如离心、过滤、浓缩等）去除结合了底物的介质（6）检测释放出的带标记的DNA的含量，同标准数值比较，得到Tn5转座酶的活性。该测活方法操作简便、快速，结果重复性好，十分适合于大批量生产中Tn5转座酶的酶活检测。 | ||
| 搜索关键词： | 底物 转座酶 快速稳定 酶活测定 反应缓冲液 酶活检测 数值比较 变性剂 盐酸胍 变性 去除 转座 过滤 浓缩 释放 检测 生产 | ||
【主权项】：
1.一种Tn5转座酶的酶活测定方法，其特征在于包含以下步骤：（1）测活底物同转座酶和反应缓冲液混合（2）进行转座反应（3）加入变性剂（如SDS、盐酸胍等）使转座酶变性，分离转座酶和DNA片段（4）加入够识别底物标记的介质，结合未反应的底物（5）通过选择性手段（如离心、过滤、浓缩等）去除结合了底物的介质（6）检测释放出的带标记的DNA的含量，同标准数值比较，得到Tn5转座酶的活性。
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