[发明专利]一种功能化聚乙烯亚胺纳米颗粒/Bcl‑2siRNA的制备方法

摘要

本发明涉及一种功能化聚乙烯亚胺纳米颗粒/Bcl‑2 siRNA的制备方法，包括功能化聚乙烯亚胺纳米颗粒{(Au0)25‑PEI‑(PEG‑RGD)10‑mPEG10}的制备；功能化聚乙烯亚胺纳米颗粒/Bcl‑2 siRNA复合物的制备。本发明的方法过程简单，实验条件温和，易操作，得到的{(Au0)25‑PEI‑(PEG‑RGD)10‑mPEG10}作为Bcl‑2 siRNA的载体应用于诱导特异性癌细胞基因沉默，具有很好的应用前景。

主权项

一种功能化聚乙烯亚胺纳米颗粒/Bcl‑2siRNA的制备方法，包括：(1)将NH2‑PEG‑COOH溶液与6‑MAL溶液混合，搅拌反应8h，得到MAL‑PEG‑COOH溶液，然后加入RGD‑SH溶液，搅拌反应12h，得到RGD‑PEG‑COOH溶液；(2)将步骤(1)中的RGD‑PEG‑COOH溶液经过EDC·HCl和NHS活化后，加入聚乙烯亚胺PEI溶液，反应24h，得到PEI‑(PEG‑RGD)10溶液，然后加入经EDC·HCl和NHS活化的mPEG‑COOH溶液，反应24h，得到PEI‑(PEG‑RGD)10‑mPEG10溶液；(3)将HAuCl4·4H2O水溶液加入到步骤(2)中的PEI‑(PEG‑RGD)10‑mPEG10溶液中，搅拌反应30min，然后加入NaBH4溶液，搅拌3h，透析，冷冻干燥，得到{(Au0)25‑PEI‑(PEG‑RGD)10‑mPEG10}；(4)将步骤(3)中的{(Au0)25‑PEI‑(PEG‑RGD)10‑mPEG10}用无菌水稀释，然后用DEPC水溶液稀释Bcl‑2siRNA，再将二者混合均匀后于37℃孵育30min，得到功能化聚乙烯亚胺纳米颗粒/Bcl‑2siRNA。