[发明专利]改性的肌酸酶

摘要

本发明涉及具有肌酸脒基水解酶活性的突变多肽，其中所述多肽在改性硫醇基的试剂存在下保持热稳定活性。本发明还涉及用于产生该突变多肽的方法；并且涉及包含该突变多肽的传感器用于测量生理流体样本中肌酸酐的用途。另外，本发明教导如何使用突变多肽提高肌酸酐传感器的寿命，以及制备传感器的方法。

主权项

一种具有肌酸脒基水解酶活性的突变多肽，其中所述多肽选自：a.包含与SEQ ID No:2具有至少80％同一性的氨基酸序列的多肽；其中第175位的氨基酸残基半胱氨酸被丙氨酸替换并且第299位的氨基酸残基半胱氨酸被丙氨酸替换，以及b.具有选自以下项的氨基酸序列的多肽：SEQ ID No 3(对应于产碱菌属(Alcaligenes sp.)肌酸脒基水解酶——Uniprot：Q9RHU9，具有替换：C175A+C299A)；SEQ ID No 7(对应于人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropic)肌酸酶——Uniprot：A0A076WGB5，具有替换：C171A+C295A)；SEQ ID No 11(对应于中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium sp.)LNHC221B00肌酸酶——Uniprot：X6DLM3，具有替换：S175A+C299A)；SEQ ID No 15(对应于玫瑰变色菌属(Roseovarius sp)TM1035肌酸酶——Uniprot：A6DVF8，具有替换：C175A+C299A)；SEQ ID No 19(对应于玫瑰变色菌属217肌酸酶——Uniprot：A3W1E4，具有替换：C175A+C299A)；SEQ ID No 23(对应于脱氮副球菌(Paracoccus denitrificans)肌酸酶——Uniprot：A1B0T5，具有替换：C175A+C299A)；SEQ ID No 27(对应于Rubellimicrobium mesophilum肌酸酶——Uniprot：A0A017HRV0，具有替换：C175A+C299A)；SEQ ID No.31(对应于福尔山洛克氏菌(Loktanella vestfoldensis)SKA53肌酸酶——Uniprot：A3V128，具有替换：C298A)；SEQ ID No.35(对应于Lutibaculum baratangense AMV1肌酸酶——Uniprot：V4RGE5，具有替换：C180A+C304A)；SEQ ID No.39(对应于玫瑰杆菌属(Roseobacter sp.)AzwK‑3b肌酸酶——Uniprot：A6FQQ7，具有替换：C299A)；SEQ ID No.43(对应于恒雄芝氏沟鞭藻玫瑰杆菌(Dinoroseobacter shibae)肌酸酶——Uniprot：A8LQJ5，具有替换：C304A)；SEQ ID No.47(对应于脱氮副球菌肌酸酶——Uniprot：A1B7I6，具有替换：C150A+C274A)。