[发明专利]克隆并进一步纯化以制备重组静脉注射免疫球蛋白的方法

摘要

本主题涉及克隆并纯化重组静脉注射免疫球蛋白(IVIG)的方法，包括克隆人免疫球蛋白靶基因；体外筛选表达该人免疫球蛋白靶基因的酵母细胞以产生酵母细胞系；将酵母细胞系发酵并收集所得到的培养基；过滤该培养基；进行弱阴离子交换层析以收集流通溶液；超滤该流通溶液以达到所需的蛋白质浓度；无菌过滤该流通溶液；纳米过滤该流通溶液以去除病毒；填装并在低pH下温育该流通溶液进行病毒灭活以获得纯化的重组IVIG。本主题涉及用于液体和冻干形式的纯化的重组IVIG，其具有五种新发现的蛋白质，即KH 33、KH 34、KH 35、KH 36和KH 37。

主权项

一种克隆并纯化重组静脉注射免疫球蛋白(IVIG)的方法，包括以下步骤：a)克隆人免疫球蛋白靶基因；b)体外筛选表达该人免疫球蛋白靶基因的酵母细胞以产生酵母细胞系；c)将该酵母细胞系发酵并收集所得到的培养基；d)用10CP+90SP过滤该培养基；e)进行弱阴离子交换层析以收集流通溶液；f)对该流通溶液进行超滤以达到所需的蛋白质浓度；g)对该流通溶液进行无菌过滤；h)用20nm过滤器对该流通溶液进行纳米过滤以去除病毒；和i)填装并在低pH下温育该流通溶液进行病毒灭活以获得纯化的重组IVIG。