[发明专利]用于加速基因组编辑的单倍体诱导系有效
申请号: | 201680050025.X | 申请日: | 2016-06-30 |
公开(公告)号: | CN107920486B | 公开(公告)日: | 2023-06-20 |
发明(设计)人: | B·W·坎贝尔;J·刘;R·M·斯图帕 | 申请(专利权)人: | 明尼苏达大学董事会 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/29;A01H1/06 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈扬扬;钱文宇 |
地址: | 美国明*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本文提供了使用含有靶向的核酸内切酶的单倍体诱导系来生成具有靶向的突变和/或基因组修饰的转基因或非转基因植物的材料和植物中方法。本文还提供。 | ||
搜索关键词: | 用于 加速 基因组 编辑 单倍体 诱导 | ||
【主权项】:
一种生成加倍的单倍体植物细胞的方法,所述植物细胞在选择的DNA序列处或其附近包含突变,所述方法包括:(a)用编码稀切核酸内切酶的核酸转化单倍体诱导系以生成用于加速基因组编辑的单倍体诱导系(HILAGE)贮存系,其具有稳定整合到其中的核酸,其中所述编码稀切核酸内切酶的核酸与在受精后的至少第一次和第二次细胞分裂期间在植物胚中表达的启动子操作性地连接,并且其中所述稀切核酸内切酶靶向所述选择的DNA序列;(b)将HILAGE贮存系与靶向的系杂交以生成包含所述稳定整合的核酸的F1合子;(c)培养所述F1合子,使得(i)所述稀切核酸内切酶被表达,并在所述选择的DNA序列处或其附近切割染色体DNA,其中切割后所述染色体DNA的修复导致所述突变,和(ii)发生基因组消除,使得来自HILAGE贮存系的染色体被消除,产生单倍体细胞;并且(d)在所述单倍体细胞中诱导染色体加倍以产生含有所述突变的加倍的单倍体植物细胞。
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